AUTORIZACIÓN Y DECLARACIÓN JURADA
DE AUTORÍA Y ORIGINALIDAD
Yo, BANDA DIAZ MIRTHA GUIOMAR, con DNI 46860255, en mi condición de autor(a)
de la tesis/ trabajo de investigación/ trabajo académico presentada para optar el
Título Profesional de “Químico Farmacéutico”, AUTORIZO a  la  Universidad  María
Auxiliadora (UMA) para reproducir y publicar de manera permanente e indefinida
en  su  repositorio  institucional,  bajo  la  modalidad  de  acceso  abierto,  el  archivo
digital  que  estoy  entregando,  en  cumplimiento  a  la  Ley  N°30035  que  regula  el
Repositorio Nacional de Ciencia, Tecnología e Innovación de acceso abierto y su
respectivo Reglamento.
Asimismo, DECLARO BAJO JURAMENTO1 que dicho documento es ORIGINAL con un
porcentaje de similitud de 12 % y que se han respetado los derechos de autor en la
elaboración del mismo. Además, recalcar que se está entregando la versión final
del documento sustentado y aprobado por el jurado evaluador.
En  señal  de  conformidad  con  lo  autorizado  y  declarado,  firmo  el  presente
documento a los 22 días del mes de diciembre del año 2022.
__________________________________ __________________________________
BANDA DIAZ MIRTHA GUIOMAR  Mg. ROSA CANDELARIA RAMÍREZ HEREDIA
DNI: 46860255                                                          DNI: 09033946
1 Se  emite  la  presente  declaración  en  virtud  de  lo  dispuesto  en  el  artículo  8°,  numeral  8.2,  tercer  párrafo,  del
Reglamento del Registro Nacional de Trabajos conducentes a Grados y Títulos – RENATI, aprobado mediante
Resolución de Consejo Directivo N° 033-2016-SUNEDU/CD, modificado por Resolución de Consejo Directivo N° 174-
2019-SUNEDU/CD y Resolución de Consejo Directivo N° 084-2022-SUNEDU/CD.
AUTORIZACIÓN Y DECLARACIÓN JURADA
DE AUTORÍA Y ORIGINALIDAD
Yo, TINEO FLORES JESSICA, con DNI 76402829, en mi condición de autor(a) de la tesis/
trabajo de investigación/ trabajo académico presentada para optar el Título
Profesional de “Químico Farmacéutico”, AUTORIZO a la Universidad María
Auxiliadora (UMA) para reproducir y publicar de manera permanente e indefinida
en  su  repositorio  institucional,  bajo  la  modalidad  de  acceso  abierto,  el  archivo
digital  que  estoy  entregando,  en  cumplimiento  a  la  Ley  N°30035  que  regula  el
Repositorio Nacional de Ciencia, Tecnología e Innovación de acceso abierto y su
respectivo Reglamento.
Asimismo, DECLARO BAJO JURAMENTO2 que dicho documento es ORIGINAL con un
porcentaje de similitud de 12 % y que se han respetado los derechos de autor en la
elaboración del mismo. Además, recalcar que se está entregando la versión final
del documento sustentado y aprobado por el jurado evaluador.
En  señal  de  conformidad  con  lo  autorizado  y  declarado,  firmo  el  presente
documento a los 22 días del mes de diciembre del año 2022.
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TINEO FLORES JESSICA              Mg. ROSA CANDELARIA RAMÍREZ HEREDIA
DNI: 76402829                                                          DNI: 09033946
2 Se  emite  la  presente  declaración  en  virtud  de  lo  dispuesto  en  el  artículo  8°,  numeral  8.2,  tercer  párrafo,  del
Reglamento del Registro Nacional de Trabajos conducentes a Grados y Títulos – RENATI, aprobado mediante
Resolución de Consejo Directivo N° 033-2016-SUNEDU/CD, modificado por Resolución de Consejo Directivo N° 174-
2019-SUNEDU/CD y Resolución de Consejo Directivo N° 084-2022-SUNEDU/CD.
ii
INFORME DE ORIGINALIDAD - TURNITIN
TESIS_MIRTHA_BANDA_JESSICA_TINEO_24-10-22.docx (10.16M)
iii
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA IN VITRO DEL EXTRACTO
HIDROALCOHÓLICO DE LAS HOJAS DE Chenopodium
ambrosioides L. (PAICO) FRENTE A Escherichia coli
ATCC® 25922
TESIS PARA OPTAR EL TÍTULO PROFESIONAL DE QUÍMICO
FARMACÉUTICO
AUTORES
Bach. BANDA DIAZ, MIRTHA GUIOMAR
https://orcid.org/0000-0002-3247-9306
 Bach. TINEO FLORES, JESSICA
https://orcid.org/0000-0002-5531-3747
ASESOR
Mg. RAMÍREZ HEREDIA, ROSA CANDELARIA
https://orcid.org/0000-0001-7675-5969
LIMA – PERÚ
 2022
iv
DEDICATORIA
A mis padres por el apoyo que siempre me
brindaron sin ninguna condición,
permitiéndome así lograr mis metas trazadas
y cumplir mis sueños.
BANDA DIAZ, MIRTHA GUIOMAR
A mi madre que con su eterna paciencia,
amor, esfuerzo y bendición han permitido
instruirme y de esta manera lograr una de mis
grandes metas.
A toda mi familia y amigos porque con sus
consejos, oraciones y palabras me hicieron”
una mejor persona y han contribuido con este
logro.
TINEO FLORES, JESSICA
v
AGRADECIMIENTO
Agradezco a Dios por permitirme estar en
esta prestigiosa universidad, a todos mis
maestros por trasmitirme sus
conocimientos, a mis compañeros de
estudio por nuestras vivencias compartidas
y también agradecer a mis padres y
hermanos por” sus consejos que me
permitieron seguir adelante y compartir con
ellos este importante logro.
BANDA DIAZ, MIRTHA GUIOMAR
Agradezco a Dios por haberme otorgado la
vida, la salud y una maravillosa madre quien
siempre ha creído en mí, a la vez dándome
el ejemplo de superación, humildad y
sacrificio.
A las autoridades que conforman esta
prestigiosa universidad en especial a
nuestra asesora Mg. Rosa Candelaria
Ramírez Heredia.
A mis profesores quienes con la gran
enseñanza y conocimientos han logrado
formarme profesionalmente.
TINEO FLORES, JESSICA
vi
ÍNDICE GENERAL
Páginas
RESUMEN ....................................................................................................... xi
ABSTRACT ..................................................................................................... xii
I. INTRODUCCIÓN ..................................................................................... 13
II. MATERIALES Y MÉTODOS .................................................................... 22
II.1. Enfoque y diseño de la investigación ................................................. 22
II.2. Población, muestra y muestreo ......................................................... 22
II.3. Variables de investigación ................................................................. 23
II.4. Técnicas e instrumentos para la recolección de datos ...................... 23
II.5. Plan metodológico para la recolección de datos ................................ 24
II.6. Procesamiento del análisis estadístico .............................................. 26
II.7. Aspectos éticos ................................................................................ 264
III. RESULTADOS ......................................................................................... 27
IV. DISCUSIÓN ............................................................................................. 36
4.1. Discusión de resultados ........................................................................ 36
4.2. Conclusiones ........................................................................................ 39
4.3. Recomendaciones ................................................................................ 40
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ................................................................ 41
vii
ÍNDICE DE TABLAS
Páginas
Tabla 1. Estudio fitoquímico del extracto hidroalcohólico de las hojas de
Chenopodium ambrosioides L. (Paico) .................................................................. 27
Tabla 2. Análisis estadístico:  grupos experimentales ........................................... 28
Tabla 3. Análisis estadístico:  grupos control ......................................................... 28
Tabla 4. Análisis de la normalidad de los datos por grupo ..................................... 30
Tabla 5. Análisis de la homogeneidad de varianzas (Levene) ............................... 30
Tabla 6. Análisis de la varianza (ANOVA) ............................................................. 31
Tabla 7. Análisis por subgrupos homogéneos ....................................................... 31
Tabla 8. Análisis de la varianza (ANOVA) ............................................................. 32
Tabla 9. Análisis por sub grupos homogéneos ...................................................... 33
Tabla 10. Análisis de la varianza (ANOVA)............................................................ 34
Tabla 11. Análisis por sub grupos homogéneos .................................................... 34
Tabla 12. Evaluación de la sensibilidad antibacteriana de Escherichia coli ATCC®
25922 mediante Duraffourd ................................................................................... 35
viii
ÍNDICE DE FIGURAS
Páginas
Figura 1. Efecto antibacteriano del extracto hidroalcohólico de Chenopodium
ambrosioides L. (Paico) al 50%, 75% y 100% y grupos control frente a Escherichia
coli ......................................................................................................................... 29
Figura 2. Recolección de la planta ......................................................................... 53
Figura 3. Extracción de las hojas y selección de la muestra .................................. 54
Figura 4. Lavado, desinfección y secado a temperatura ambiente de las hojas .... 55
Figura 5. Secado y deshidratación en estufa de las hojas de paico ...................... 56
Figura 6. Pulverizado de las hojas de paico .......................................................... 57
Figura 7. Maceración del pulverizado de las hojas de paico .................................. 58
Figura 8. Filtración y evaporación del solvente ...................................................... 58
Figura 9. Obtención del extracto seco de la especie vegetal ................................. 59
Figura 10. Marcha fitoquímica ................................................................................ 60
Figura 11. Activación de la cepa ............................................................................ 61
Figura 12. Preparación del cultivo bacteriano ........................................................ 62
Figura 13. Sembrado del cultivo en placa .............................................................. 63
Figura 14. Preparación de pozos en agar e identificación ..................................... 64
Figura 15. Aplicación del extracto de paico a diferentes concentraciones sobre agar
 ............................................................................................................................... 65
Figura 16. Recolección de datos de la ciprofloxacina ............................................ 66
Figura 17. Recolección de datos de los extractos de Paico ................................... 66
ix
ÍNDICE DE ANEXOS
Páginas
Anexo 1. Instrumento de recolección de datos del estudio fitoquímico del extracto.
 ............................................................................................................................... 46
Anexo 2. Instrumento de recolección de datos de la actividad antibacteriana ....... 47
Anexo 3. Matriz de consistencia ............................................................................ 48
Anexo 4. Operacionalización de las variables........................................................ 49
Anexo 5. Certificado botánico ................................................................................ 50
Anexo 6. Certificado ATCC® de análisis de Escherichia coli ................................. 51
Anexo 7. Evidencias del trabajo realizado ............................................................. 53
x
RESUMEN
Objetivo: Determinar la actividad antibacteriana in vitro del extracto hidroalcohólico
de las hojas de Chenopodium ambrosioides L. (Paico) frente” a Escherichia coli
ATCC® 25922.
Método: “El método se basó en un enfoque cuantitativo, prospectivo, transversal con
diseño experimental, la población estuvo conformada por Chenopodium
ambrosioides L. (Paico) la cual fue recolectada de una zona del distrito de San Juan
de Cutervo - Cajamarca, empleando una muestra de 3 kilos de hojas para el extracto
hidroalcohólico obtenido por medio de la técnica de maceración y la actividad
antibacteriana in vitro frente a Escherichia coli ATCC® 25922 se determinó mediante
la técnica de difusión en pozos.
Resultados: El estudio fitoquímico reveló la presencia de compuestos fenólicos
(+++), quinonas (++), triterpenos (++) y alcaloides (+). Los halos de inhibición que
demuestran la actividad antibacteriana del extracto hidroalcohólico fueron de
13,13+0,26mm al 100%, de 12,62+0,32mm al 75% y de 11,11+0,28mm al 50%; para
el control positivo (ciprofloxacino) fue de 26,63+0,26mm; del mismo modo para el
control negativo (etanol 70°) fue de 6,22+0,29mm.
Conclusión: El extracto hidroalcohólico de las hojas de Chenopodium ambrosioides
L. (Paico) presenta actividad antibacteriana frente a Escherichia coli, a diferentes
concentraciones, el ciprofloxacino presentó mayor halo en comparación con el
extracto.
Palabras clave: Escherichia coli, Chenopodium ambrosioides, antibacteriano.
xi
ABSTRACT
Objective: To determine the in vitro antibacterial activity of the hydroalcoholic extract
of the leaves of Chenopodium ambrosioides L. (Paico) against Escherichia coli”
ATCC® 25922.
Method: The method “was based on a quantitative, prospective, cross-sectional
approach with an experimental design, the population was made up of Chenopodium
ambrosioides L. (Paico) which was collected from an area of the district of San Juan
de Cutervo - Cajamarca, using a sample of 3 kilos of leaves for the hydroalcoholic
extract obtained by means of the maceration technique and the in vitro antibacterial
activity against Escherichia coli ATCC® 25922 was determined by means of the
diffusion technique in wells.
Results: The phytochemical study revealed the presence of phenolic compounds
(+++), quinones (++), triterpenes (++) and alkaloids (+). The inhibition halos that
demonstrate “the antibacterial activity of the hydroalcoholic extract were
13.13+0.26mm at 100%, 12.62+0.32mm at 75% and 11.11+0.28mm at 50%; for the
positive control (ciprofloxacin) it was 26.63+0.26mm; in the same way for the
negative control (70° ethanol) it was” 6.22+0.29mm.
Conclusion: The hydroalcoholic extract of the leaves of Chenopodium ambrosioides
L. (Paico) has antibacterial activity against Escherichia coli, at different
concentrations, ciprofloxacin had a higher halo compared to the extract.
Keywords: Escherichia coli, Chenopodium ambrosioides, antibacterial.
xii
I. INTRODUCCIÓN
Dentro de las enfermedades que adolece el ser humano las causadas por
microorganismos, definitivamente se consideran uno de los problemas de salud
de mayor dificultad a la hora del tratamiento, estos microorganismos pueden ser
bacterias, hongos, virus” y parásitos, las cuales se encuentran distribuidas por
todo el mundo1.
Microorganismos patógenos como la bacteria Escherichia coli, es considerada
como la causa más común en infecciones en el hombre, “a pesar que la mayoría
de estas especies o variedades pueden resultar ser inofensivas, otras causan
grandes complicaciones en la salud, la sintomatología que produce este tipo de
bacteria va desde aumento de temperatura, cólicos, emesis, inclusive diarrea
con sangre siendo la forma de contagio principal a través de los alimentos, lo
que la hace altamente infectiva.2
Las instituciones internacionales de salud como la Organización de las Naciones
Unidas para la Agricultura y la Alimentación (FAO) han registrado según los
datos de los estudios realizados en 21 naciones a nivel mundial que la infección
producida por este tipo de bacteria se estima en 0.6 casos por cada cien mil
personas al año en los países del continente africano, sin embargo esta cifra
varía de país a país, observando que en los países del mediterráneo la cifra se
mantiene en 136 casos por 100,000 habitantes por año.3
Los brotes de infecciones por este tipo de microorganismos siempre han sido
una causa importante de morbilidad y mortalidad en todo el mundo y es una de
las principales causas de muerte por enfermedades intestinales infecciosas”
entre niños pequeños en países de ingresos bajos y medianos. Asimismo, este
patógeno causa un déficit económico en la población, por ejemplo, en el 2011
uno de los brotes más transcendentales de E. coli dejó 53 muertes y en Alemania
produjo pérdidas económicas de hasta 1.3 millones de dólares.4
Escherichia coli es sin lugar a dudas el principal agente etiológico causante de
infecciones diarreicas, principalmente en niños con un índice de 0.8 y 2 millones
de muertes en niños” que no sobrepasan los 5 años de edad, según cifras
registradas por países latinoamericanos.5
13
Además en las últimas décadas, el uso generalizado, indiscriminado y, en
muchos casos, irresponsable, de los antibióticos, ha traído consigo un aumento
marcado de las resistencias de los microorganismos a los principales
antimicrobianos, lo que supone un importante problema para el tratamiento de
las infecciones en nuestro país, tal es el caso, que en “un estudio de cohorte
realizado en Moyobamba y Urubamba registró un crecimiento de resistencia para
el ácido nalidíxico y cotrimoxazol de 11.6% y 6.4% respectivamente.6
Así mismo, una investigación realizada en un hospital importante del Perú,
reporta que E. coli diarreogénica es un agente importante y frecuente “en las
diarreas producidas en niños.7 Sin duda, esta bacteria genera una gran
problemática en el sector salud a nivel mundial y local, además de la resistencia,
se está produciendo, razón por la cual es necesario la búsqueda de alternativas
de tratamiento sobre todo que no incremente el problema de la resistencia
bacteriana, en tal sentido, se ha tomado en consideración a Ch. ambrosioides
(Paico) ya que mediante estudios existen reportes de su beneficio en el campo
de la salud.
El presente estudio se relaciona con el siguiente marco teórico; Chenopodium
ambrosioides L. (Paico) es una especie vegetal la cual tiene un crecimiento
anual y perenne, llega a medir de 1 m a 0,7 m. Los productos que se obtienen
de la semilla y las flores pueden ser altamente tóxicas; el consumo en exceso
puede causar mareos, vómitos, convulsiones e incluso la muerte. El consumo
de esta planta también puede causar dermatitis u otras reacciones alérgicas.
Las “hojas y semillas de todos los miembros de este género son relativamente
comestibles; sin embargo, muchas de las especies de este género contienen
saponinas, aunque generalmente en cantidades demasiado pequeñas para
hacer daño. Aunque las saponinas son tóxicas, son mal absorbidas por el cuerpo
y la mayoría son eliminadas sin causar ningún problema, además también se
descomponen en gran medida en el proceso de cocción.8 Ciertos estudios
realizados sobre Chenopodium ambrosioides demostraron la presencia” de
metabolitos secundarios como hexosas, aminoácidos, fenoles, esteroles,
monoterpenoides y terpenoides, carotenoides (α-caroteno y b-caroteno).9
Entre los metabolitos secundarios de Chenopodium ambrosioides se tiene a los
compuestos fenólicos de los cuales se encontró treinta y cinco compuestos, ocho
14
eran ácidos fenólicos (derivados del ácido hidroxicinámico), cinco compuestos
eran derivados del ácido p-cumárico, los otros tres fueron identificados como
derivados del ácido ferúlico, el resto de compuestos fenólicos son flavonas y
flavonoles, siendo la mayoría derivados de la quercetina y el kaempferol. Los
flavonoides fueron los compuestos fenólicos más abundantes (quercetina
46,98% y kaempferol 45,91%), seguidos de los ácidos fenólicos (6,58%).10
Los metabolitos secundarios son sustancias producidas por las plantas que las
hacen necesarias en su propio entorno, estas pequeñas moléculas ejercen una
amplia gama de efectos sobre la propia planta y sobre otros organismos vivos,
entre estos, inducen la floración, la protección, mantienen el crecimiento perenne
o señalan el comportamiento caducifolio. Actúan como antimicrobianos y
desempeñan el papel de atrayentes o, por el contrario, como repelentes, se han
descubierto más de 50.000 metabolitos secundarios en el reino vegetal; las
hierbas medicinales y muchas medicinas modernas dependen de los metabolitos
secundarios de las plantas para producir su acción. La búsqueda de nuevos
metabolitos secundarios en plantas con la esperanza de descubrir nuevos
productos o, mejor aún, nuevos enfoques para el tratamiento de enfermedades,
es un proceso continuo que involucra a instituciones académicas y
farmacéuticas.1
Por otro lado, la “actividad antibacteriana de una molécula está completamente
asociada con los compuestos que matan bacterias o disminuyen su tasa de
crecimiento, sin ser ampliamente tóxicos para los tejidos cercanos. Los agentes
antimicrobianos descubiertos más recientemente son compuestos naturales
modificados y esta modificación se realiza de manera química en su
estructura, por ejemplo, b-lactámicos, carbapenems o cefalosporina, productos
naturales puros, como los aminoglucósidos, y otros antibióticos totalmente
sintéticos, por ejemplo, las sulfonamidas, también se utilizan con frecuencia. Los
agentes antimicrobianos podrían clasificarse como los agentes que pueden ser
bactericidas, que matan las bacterias, o bacteriostáticos, que disminuyen el
crecimiento de las bacterias. Los agentes antibacterianos son los más
importantes “en la lucha contra las enfermedades infecciosas; pero, con su
amplio uso y abuso, ha provocado la aparición de resistencia bacteriana hacia
los agentes antibacterianos, esto se ha convertido en un problema importante
15
para la industria farmacéutica actual.2
Así mismo, Escherichia coli presenta la forma cilíndrica alargada, es Gram
negativo, su secuencia de ADN presenta doble hebra circular de más de 4
millones de pares de bases que siguen una secuencia ordenada. Su replicación
es rápida a 37°C, cada 20 minutos, lo que facilita la multiplicación del ADN o de
la proteína de interés, esta bacteria se aloja de forma habitual a nivel intestinal
en los mamíferos, incluidos los humanos. Existen variedades de esta cepa,
algunos de ellas suelen ser patógenas y pueden causar infecciones
intestinales, infecciones del tracto urinario o genital.1
Escherichia coli se considera un germen indicador de contaminación fecal del
agua potable, el agua de baño y los alimentos, por tal motivo, es de gran
importancia no solo como germen indicador, sino sobre todo como patógeno. Es
el patógeno más común aislado en materiales de examen patológico.2
Factores de patogenicidad:
Escherichia coli tiene varios factores de patogenicidad:
● Cápsula.
● Haftpili.
● Lipopolisacárido como endotoxina.
● Exotoxinas.
Microbiológicamente se distinguen tres grupos de serotipos: antígenos
O, antígenos H y antígenos K. "O" se refiere a las fracciones de oligosacáridos de
los lipopolisacáridos de la envoltura celular bacteriana, "H" para los flagelos y "K"
para la cápsula. Existen alrededor de 180 serogrupos "O", 56 tipos "H" y
alrededor de 80 antígenos K diferentes en Escherichia coli.3
Formas
● Escherichia coli patógena opcional: Las cepas de Escherichia coli
pertenecientes a la flora intestinal residente son opcionalmente
patógenas. Pueden convertirse en agentes causantes de infecciones del
tracto urinario (alto riesgo de autoinoculación en mujeres), infecciones de
heridas, neumonía, peritonitis y colecistitis, así como meningitis infantil
(cepa de Escherichia coli de cápsula tipo 1).
16
● Escherichia coli Enterotóxico (ETEC) causa enfermedades como:
− Diarrea libre de leucocitos.
− Diarrea del viajero.
ETEC produce una toxina termolábil y estable al calor, con el lábil térmico
similar a la toxina del cólera y estable al calor a la toxina de la tos ferina.
La toxina lábil térmica consta de dos subunidades, unidad A y B. La unidad
B se une a una membrana celular, después de lo cual la unidad A se
hunde en la célula y actúa como una enzima en ella. La ribosilación de
la proteína inhibidora conduce a la desinhibición de la adenilato ciclasa y
a un aumento del AMPc. Como resultado, la diarrea acuosa es causada
por una emisión de agua e iones de las células. Como terapia, una gran
cantidad de bebida (jugos de frutas, soluciones de rehidratación) está en
primer plano, ya que la pérdida de electrolitos debe compensarse.
● Escherichia coli enteropatógena (EPEC). Este patógeno causa
principalmente dispepsia y diarrea en la infancia. Con la ayuda del "factor
de adhesión" (EAF), el patógeno puede adherirse a las células
epiteliales del intestino delgado e inyectar moléculas tóxicas en
los enterocitos a través de un sistema de secreción tipo III. La terapia para
una enfermedad causada por EPEC también consiste en la
rehidratación y, si es necesario, compensar la pérdida de electrolitos.
● Escherichia coli Enteroinvasivo  (EIEC) es  el  tercer  grupo  de
Escherichia coli patógena. Causan heces mucosas sanguinolentas y ricas
en leucocitos. Patogénicamente, hay una invasión de los epitelios
intestinales. Como característica especial se puede entender la salida de
las vesículas de fagocitosis (escape endosómico). A diferencia de ETEC,
EIEC experimenta fiebre después de la infección.
● Escherichia coli enterohemorrágica (EHEC ). Causa diarrea
sanguinolenta y puede conducir a complicaciones graves, posiblemente
letales. EHEC forma la toxina Shiga, también conocida como verotoxina,
esto tiene un efecto intracelular y hace que toda la célula epitelial muera.
● Escherichia coli enteroagregativa (EAEC ). EAEC es otro subtipo que
puede conducir a diarrea acuosa, aguda o crónica, acuosa - mucosa.
Estimula la producción de moco con la ayuda de la adherencia fimbria.
17
● Escherichia coli adherente difusa (DAEC), también desencadena
una infección intestinal. Este patógeno conduce a la diarrea,
especialmente en niños entre 18 meses y cinco años de edad.4,5
Las cepas bacterianas son cultivadas en laboratorios especializados a las que
se les denomina como “CEPAS ATCC y son   herramientas indispensables para
el control de calidad en los laboratorios microbiológicos, son microorganismos
certificados utilizados en diferentes disciplinas, para el control de calidad en
microbiología, estas tienen como objetivo garantizar la trazabilidad de sus
resultados, deben utilizar cepas de referencia de microorganismos, obtenidos
directamente de una colección nacional o internacional reconocida.
La ciprofloxacina se usa para tratar o prevenir ciertas infecciones causadas por
bacterias como la neumonía; gonorrea (una enfermedad de transmisión sexual);
fiebre tifoidea (una infección grave que es común en los países en desarrollo);
diarrea infecciosa (infecciones que causan diarrea severa); e infecciones de la
piel, los huesos, las articulaciones, el abdomen (área del estómago) y la próstata
(glándula reproductiva masculina), la ciprofloxacina también se usa para tratar o
prevenir la peste (una infección grave que puede propagarse a propósito como
parte de un ataque bioterrorista) y el ántrax por inhalación (una infección grave
que puede propagarse por gérmenes de ántrax en el aire a propósito como parte
de un ataque bioterrorista). La ciprofloxacina también se puede usar para tratar
bronquitis, infecciones sinusales o infecciones del tracto urinario, pero no debe
usarse para bronquitis e infecciones sinusales, o ciertos tipos de infecciones del
tracto urinario si hay otras opciones de tratamiento. Las tabletas de ciprofloxacina
de liberación prolongada (acción prolongada) se usan para tratar infecciones
renales y del tracto urinario; sin embargo, algunos tipos de infecciones del tracto
urinario solo deben tratarse con tabletas de liberación prolongada de
ciprofloxacina si no hay otras opciones de tratamiento disponibles. La
ciprofloxacina pertenece a una clase de antibióticos llamados fluoroquinolonas.
Funciona matando las bacterias que causan” infecciones. El ciprofloxacino, es
considerada un referente a la hora de comparar nuevas fluoroquinolonas,
comparte con estos agentes un mecanismo de acción común: la inhibición de la
ADN girasa, el ciprofloxacino demostró una actividad bastante buena contra las
bacterias grampositivas, es contra los organismos gramnegativos como
18
Escherichia coli,  que demostró ser más potente que otras fluoroquinolonas.3
Entre los antecedentes internacionales del estudio podemos citar a Santiago J.
et al (2016), en su estudio realizado en Brasil, mediante su investigación “Aceite
esencial de Chenopodium ambrosioides L., estructuras secretoras, actividades
antibacterianas y antioxidantes” tuvo por objetivo, evaluar las actividades
antibacterianas y antioxidantes del aceite esencial de Chenopodium
ambrosioides L., y determinar sus estructuras secretoras. Los resultados del
estudio mostraron que la actividad antioxidante demostrada por la prueba
linoleica de β-caroteno/ácido, con CI 50 =455,7μg/ml. Este aceite también
presentó actividad antibacteriana tanto para bacterias Gram negativas y
positivas. La CMI varió de 62,5 a 250μL/mL. Se observó la presencia de terpenos
en los tricomas glandulares, lo que sugiere que el aceite esencial es secretado
por estas estructuras.14
Ajaib M, Hussain T, Farooq S, Ashiq M (2016), en su investigación realizada en
Pakistan, titulada “Análisis de las actividades antimicrobianas y antioxidantes de
Ch. ambrosioides: una planta etnomedicinal” se evaluó la actividad en la corteza
y fruto por diferentes técnicas analíticas. Los resultados encontrados en el estudio
fueron, ambas partes mostraron resultados antimicrobianos y antioxidantes
satisfactorios. El máximo potencial antibacteriano es exhibido por la corteza
macerada en éter de petróleo contra Bacillus subtilis y el máximo potencial
antifúngico exhibido por extractos de metanol de la fruta contra Aspergillus
niger (mm). Los extractos acuosos no mostraron ninguna actividad contra
organismos seleccionados. El valor mínimo (significativo) de MIC exhibido por el
extracto de fruta contra Staphylococcus aureus fue de 0,7 mg/ml, los extractos
metanólicos exhibieron actividad frente a los microorganismos estudiados. Los
extractos acuosos de corteza y fruta exhibieron el máximo potencial antioxidante
en todos los ensayos, excepto en el ensayo DPPH. El extracto de corteza de éter
de petróleo mostró un valor máximo de % DPPH.15
Althobaiti F (2020), en su investigación “Evaluación del extracto de hoja de
Chenopodium Ambrosioides de la región de Taif, Arabia Saudita, sobre
antimicroorganismos y la evaluación de su diversidad genética utilizando el
ensayo RAMP” cuyo objetivo fue “evaluar el efecto antimicrobiano del extracto
19
metanólico de Ch. Ambrosioides, frente a hongos, bacterias Gram (+) y Gram (-)
como P. vulgaris y E. coli”. Los resultados del estudio mostraron halos de
inhibición promedio al aplicar el método de difusión en pozo de 10mm para P.
vulgaris y para E. coli halo de 15mm.16
Tchani G. et al (2021), en su publicación “Estudio Fitoquímico y Actividad
Antioxidante Comparativa de Extractos de Partes Aéreas de Chenopodium
ambrosioides Linn”. El objetivo del estudio se basó en la identificación de
compuestos fitoquímicos (por coloración y precipitación) y su capacidad
antioxidante de los extractos acuosos y etanólicos de las hojas y semillas de
Chenopodium ambrosioides. Las pruebas del tamizaje fitoquímico en ambos
extractos revelaron la presencia de flavonoides, taninos, terpenoides, terpenos y
en el extracto acuoso se encontró alcaloides; el método DPPH indicó que el
extracto acuoso posee más capacidad antioxidante que el extracto etanólico.17
En relación a los antecedentes nacionales contamos con el estudio de Sanchez
S. et al (2016), quienes desarrollaron un estudio in vitro mediante la formulación
de un extracto hidroalcohólico de las hojas de Chenopodium ambrosioides
(paico) y mediante la técnica microbiológica de macrodilución en caldo. El
objetivo fue determinar su efecto frente a cepas de Staphylococcus aureus y
Escherichia coli, en la ciudad de Iquitos. A través, de la técnica microbiológica
se afirmó que el extracto de paico presentó una concentración mínima inhibitoria
alta para Staphylococcus aureus ATCC® 25923 y para Escherichia coli ATCC®
25922 fue media, por lo tanto, se consideró que existe efecto antibacteriano del
extracto de paico contra Staphylococcus aureus.18
Izquierdo, H (2016) en su investigación in vitro, determinaron la eficacia
antibacteriana del extracto etanólico de Chenopodium ambrosioide L. “paico” y
el extracto de Pimpinella anisum L. “anís”, el cual se comparó con ciprofloxacina
sobre una cepa de Escherichia coli. Los resultados evidenciaron que ambos
extractos presentan eficacia antibacteriana sobre Escherichia coli presentando
en el rango de resistente para la sensibilidad antibacteriana con diámetro de
halo menor a 15 mm.19
Guzmán E. et al (2021) en su investigación titulada “Efecto antibacteriano in vitro
20
del extracto etanólico de las hojas de Chenopodium ambrosioides L. “Paico” y
Schinus molle “Molle” frente a cepas de Staphylococcus aureus, 2021”
realizaron un estudio fitoquímico y determinó efecto antibacteriano aplicando la
técnica de Kirby Bauer, los extractos etanólicos fueron obtenidos mediante
maceración. Como resultados en el estudio fitoquímico se observó que
Chenopodium ambrosioides L. “Paico” presenta “flavonoides, compuestos
fenólicos, taninos, triterpenos, lactonas y alcaloides, con respecto al efecto
antibacteriano del extracto” de Chenopodium ambrosioides L. “Paico” presentó
halo de inhibición de 8,86 + 0,25mm.20
El objetivo del estudio planteado es:
Determinar la actividad antibacteriana in vitro del extracto hidroalcohólico de las
hojas de Chenopodium ambrosioides L. (Paico) frente a Escherichia coli ATCC®
25922, con respecto al planteamiento de los objetivos secundarios tenemos:
En tal sentido se plantea la siguiente hipótesis general del estudio: El extracto
hidroalcohólico de las hojas de Chenopodium ambrosioides L. (Paico) presenta
actividad antibacteriana in vitro frente  a Escherichia coli ATCC®  25922  y  el
planteamiento de las hipótesis secundarias son.
21
II. MATERIALES Y MÉTODOS
II.1. Enfoque y diseño de la investigación.21,22
Cuantitativo: La investigación presentó una orientación cuantitativa, los
datos recolectados fueron presentados con datos numéricos o variables
cuantificables.
Prospectivo: Los datos en estudio fueron recolectados en el transcurso del
tiempo, a futuro, es decir, posterior al planteamiento del mismo.
Transversal: El estudio analizaron las variables durante un solo periodo de
tiempo.
Experimental: Debido al manejo científico de las variables donde una de
ellas se mantiene constante y experimenta una alteración, existe
manipulación deliberada de estas por parte del investigador.16–18
II.2. Población, muestra y muestreo
● Población vegetal:
Compuesta por 6 kilogramos de la especie vegetal Chenopodium
ambrosioides L. (Paico) la cual fue recolectada de una zona del distrito de
San Juan de Cutervo, Provincia de Cutervo, ubicado en el departamento
de Cajamarca, según coordenadas geográficas a 6°10′27″ de latitud Sur
y  78°35′55″ longitud Oeste, a una altura 2070 m.s.n.m.
● Muestra vegetal:
Se utilizaron 3 kilogramos de hojas de Chenopodium ambrosioides L.
(Paico).
Criterios de inclusión: Identificación taxonómica de la especie vegetal
en estudio, hojas de similar tamaño, forma y color, extracción
directamente de la planta.
Criterios de exclusión: Muestra recolectada de diferente zona
geográfica, contaminación de la muestra, presencia de plagas o
tratamiento por insecticidas.
● Población bacteriana:
Bacteria de Escherichia coli, adquiridas comercialmente del Laboratorio
Microbiologics.
22
● Muestra bacteriana:
Cepas puras de Escherichia coli ATCC® 25922, cultivadas en ambiente
controlado.
Criterios de inclusión: Cepa ATCC con certificado de análisis,
concentración bacteriana de 0.5 en la escala de MacFarland.
Criterios de exclusión: Cepa silvestre, de otra variedad, cepa
contaminada.
● Muestreo:
Debido a las facilidades para adquirir la muestra en estudio se aplicó el tipo
de muestreo no probabilístico por conveniencia.23
II.3. Variables de investigación
● Variable independiente: Extracto hidroalcohólico de las hojas de
Chenopodium ambrosioides L. (PAICO).
Definición conceptual: Sustancia extraída por medios físicos mediante
maceración de las hojas de Chenopodium ambrosioides L. (PAICO) y que
contiene los principios activos.
Definición operacional:  Maceración de las hojas de Chenopodium
ambrosioides L. (paico).
● Variable dependiente: Actividad antibacteriana in vitro sobre Escherichia
coli ATCC® 25922.
Definición conceptual: Proceso de disminución o muerte de la bacteria
Escherichia coli ATCC® 25922 por medio de un agente antibacteriano.
Definición operacional: Aplicación del método de difusión en pozo, con
medición de los halos de inhibición.
II.4. Técnicas e instrumentos para la recolección de datos
Técnicas:
Maceración: Proceso en el cual participaron dos tipos de componentes, uno
líquido el cual es el extrayente y uno sólido que es el componente del cual se
extraen los “metabolitos secundarios de la” planta.24
Difusión en pozo: Es una técnica modificada de Kirby Bauer, en la cual se
23
preparó pozos en el cultivo bacteriano en agar, esto permitió “determinar la
actividad antibacteriana por medio de la acción que ejerce una sustancia sobre
una bacteria, mostrado mediante la formación de halo de inhibición.25
Instrumentos:
Ficha de recolección de datos: Instrumento que sirvió para llevar el registro de
los datos de forma ordenada y a la vez sirve como base de datos físico.
II.5. Plan metodológico para la recolección de datos
Preparación de los extractos:
● Se pesaron 3.0 Kg., y se extrajeron las hojas frescas de la planta, las que
fueron lavadas con abundante agua.”
● Luego fueron desinfectadas en una tina con hipoclorito de sodio al 0,5%
por 6 minutos.”
● Luego se volvieron a lavar con abundante agua, se dejó escurrir el agua
y fueron colocadas sobre papel kraft sobre una mesa para su secado a
temperatura ambiente (24°C-27°C) por 48 horas.”
● Posteriormente fueron colocadas en una estufa para eliminar cualquier
resto de agua, aproximadamente por 6 horas a temperatura de 40°C.”
● Transcurrido este tiempo se trozaron manualmente y se colocaron en el
molino de cuchillas y se procedió a pulverizar por completo, el polvo
obtenido fue tamizado con una malla de 1mm.”
● Maceración: El pulverizado obtenido se separó y se colocó en un frasco
ámbar de 4 litros, se agregó 1300 ml de etanol 70° y posteriormente se
dejó macerar por 10 días con agitación cada 12 horas por 5 minutos.”
● Obtención del extracto seco: Luego se llevó a filtrado con papel de filtro
24
Whatman N° 01 y luego el filtrado se colocó en la estufa a 45°C hasta su
completa evaporación, hasta obtener el extracto seco.”
Reactivación de la cepa de Escherichia coli:26,27
● La cepa fue activada siguiendo los procedimientos consignados en las
guías de microbiología para la activación de la cepa, para lo” cual “el
liofilizado reconstituido se aplicó en placas con agar Mac Conkey hisopando
toda la superficie de la” placa.
● Se llevó a incubación por 24 horas y confirmó el crecimiento de colonias.
● Luego se tomaron dos colonias con un hisopo estéril la cual se disolvió en
solución salina fisiológica en un tubo de ensayo.
● Se hicieron diluciones sucesivas hasta alcanzar la concentración
bacteriana similar al 1.5 x 108 UFC comparado con la escala de” Mc
Farland.
Sembrado de cultivos bacteriano de Escherichia coli:
● De este último tubo se realizó sembrado en estrías en placas Petri con agar
Müller” Hinton.
● Luego se prepararon 3 pocitos en placas para los grupos de tratamiento
con extracto hidroalcohólico de paico al 100%, 75% y 50%.
● Los grupos control con etanol 70° y ciprofloxacino; se aplicó 30uL de cada
extracto y grupos control en los pocitos respectivamente.
● Se llevó a una incubadora por 24 horas a 36 + 1°C para luego visualizar el
tamaño de los halos formados en cada placa.
Evaluación del efecto antibacteriano:
● Se retiraron las placas y se visualizó a tras luz la formación de halo de
inhibición.
● Se registraron los datos en la ficha de recolección de datos en milímetros
25
el diámetro del halo de inhibición.
II.6. Procesamiento del análisis estadístico
El procesamiento de los datos recolectados se realizó por medio del
análisis empleando el software estadístico SPSS versión 26, el que
permitió realizar un análisis descriptivo de cada grupo de datos, además
se aplicó pruebas inferenciales de ANOVA y Tukey, para contrastar la
hipótesis del estudio con un nivel de confianza del 95% y 0.05 de
significancia.
II.7. Aspectos éticos
El principio ético en el cual se basó el presente trabajo de investigación es
el de no maleficencia, por medio del cual se consideraron todas las
medidas de bioseguridad para evitar, causar daño a los investigadores y al
medio ambiente, por lo tanto, se brindará los EPP (Equipos de Protección
Personal) y el material necesario, para evitar los riesgos propios del
estudio.
26
III. RESULTADOS
Tabla 1. Estudio fitoquímico del extracto hidroalcohólico de las hojas de Chenopodium
ambrosioides L. (Paico)
Prueba Identificación Color / Precipitado Intensidad
Shinoda Flavonoides amarillo +
Tricloruro férrico Compuestos fenólicos Azul violeta +++
Taninos - -
Dragendor Alcaloides Naranja ladrillo +
Bortanger Quinonas rojo ++
Liebermann - Triterpenos y esteroides Anillo verde-azulado ++
Burchard
Espuma Saponinas - -
Test Mucílago Mucílago - +
Fuente: Elaboración propia
Leyenda:
● Alta : +++
● Media : ++
● Baja : +
● Ausencia : -
Interpretación:
Tabla 1, se observa la Marcha fitoquímica donde se identificó los metabolitos
secundarios encontrados en el extracto de Chenopodium ambrosioides L. (Paico);
existe alta cantidad (+++) compuestos fenólicos, cantidad media (++) de quinonas
y triterpenos; Baja cantidad (+) de alcaloides y mucílago, así mismo se observa
Ausencia (-) de taninos y saponinas.
27
Tabla 2. Análisis estadístico:  grupos experimentales
Diámetro del halo de inhibición
95% Intervalo de confianza
para la media
Desviación Error Límite
N Media estándar estándar Superior Límite Inferior Mínimo Máximo
Ext. Paico   100% 10 13,13 0,26 0,07 12,97 13,29 12,83 13,55
Ext. Paico    75% 10 12,62 0,32 0,12 12,35 12,90 11,98 13,20
Ext. Paico    50% 10 11,11 0,28 0,06 10,96 11,26 10,87 11,58
Fuente: Elaboración propia.
Interpretación:
Tabla 2, se muestra los datos encontrados para la media de halos de inhibición de
13,13+0,26mm para el extracto de Paico al 100%, de 12,62+0,32mm para el
extracto al 75% y de 11,11+0,28mm para el extracto al 50%, así mismo, se muestra
los estadígrafos con respecto a la desviación, intervalos de confianza, valores
máximo y mínimo encontrados.
Tabla 3. Análisis estadístico:  grupos control
Diámetro del halo de inhibición
95% Intervalo de
confianza para la media
Desviación Error Límite Límite
N Media estándar estándar Superior Inferior Mínimo Máximo
Control negativo (etanol 70°) 10 6,22 0,29 0,19 5,79 6,64 5,26 7,04
Control Positivo (ciprofloxacino) 10 26,63 0,26 0,13 26,33 26,92 26,04 27,47
Fuente: Elaboración propia
Interpretación:
Tabla 3, observamos los datos encontrados para la media de halos de inhibición de
26,63+0,26mm para el ciprofloxacino (control positivo) y de 6,22+0,29mm para el
etanol (control negativo), así mismo, se muestra los estadígrafos con respecto a la
desviación, intervalos de confianza, valores máximo y mínimo encontrados.
28
30.00 26.63mm
25.00
20.00
15.00 13.13mm 12.62mm 11.11mm
10.00 6.22mm
5.00
0.00
Ext. Paico  - Ext. Paico    - Ext. Paico   - 50% Control negativo Control Positivo
100% 75% (etanol 70°) (ciprofloxacino)
GRUPOS DE TRABAJO
Figura 1. Efecto antibacteriano del extracto hidroalcohólico de Chenopodium
ambrosioides L. (Paico) al 50%, 75% y 100% y grupos control frente a
Escherichia coli
Fuente: Elaboración propia
Figura 1, muestra los valores promedio de los halos de inhibición de los grupos
experimentales y control, donde se puede apreciar un mayor tamaño de los grupos
experimentales con respecto al control negativo, lo que demuestra el efecto
antibacteriano por parte de Chenopodium ambrosioides L. (Paico) a las
concentraciones del 50%, 75% y 100% frente a Escherichia coli, por otro lado, se
observa que el efecto antibacteriano es superior en el ciprofloxacino (control
positivo) comparado con los extractos de paico.
29
MEDIA DE DIÁMETRO DE INHIBICIÓN
Tabla 4. Análisis de la normalidad de los datos por grupo
Shapiro-Wilk
Grupos de trabajo Estadístico df Sig.
Ext. Paico  - 100% 0,970 10 0,891
Diámetro del halo de inhibición (mm) Ext. Paico    - 75% 0,957 10 0,750
Ext. Paico   - 50% 0,839 10 0,142
Control negativo (etanol 70°) 0,918 10 0,338
Control Positivo (ciprofloxacino) 0,958 10 0,757
Fuente: Elaboración propia
Interpretación:
Tabla 4, mediante la prueba de Shapiro-Wilk se logró demostrar al comparar los
valores de significancia obtenidos por cada grupo de trabajo con lo aceptado por el
estudio (0.05) mediante el software estadístico SPSS ver. 26 que todos los grupos
analizados presentan distribución normal en el comportamiento de sus datos
recolectados.
Tabla 5. Análisis de la homogeneidad de varianzas (Levene)
Estadístico de p-
Levene df1 df2 valor
Basado en la media 2,593 4 45 0,149
Diámetro del halo Basado en la mediana 1,927 4 45 0,122
de inhibición Basado en la mediana con ajuste de df 1,927 4 28,14 0,133
Basado en la media recortada 2,581 4 45 0,050
Fuente: Elaboración propia
Interpretación:
Tabla 5, la prueba de Levene permite hacer un análisis, basado en la media del
nivel de desviación que presenta en su distribución los datos recolectados y
determinar si esta variación es homogénea o heterogénea, de los valores obtenidos
mediante la prueba se observa que todos los parámetros son superiores al valor de
significancia del estudio, por lo tanto, se confirma que los grupos de datos presentan
varianzas homogéneas.
30
CONTRASTACIÓN DE LA HIPÓTESIS GENERAL:
H0: El extracto hidroalcohólico Chenopodium ambrosioides L. (Paico) no presenta
actividad antibacteriana in vitro frente a Escherichia coli ATCC® 25922.
H1: El extracto hidroalcohólico Chenopodium ambrosioides L. (Paico) presenta
actividad antibacteriana in vitro frente a Escherichia coli ATCC® 25922.
Tabla 6. Análisis de la varianza (ANOVA)
Diámetro del halo de inhibición
Suma de cuadrados df Media al cuadrado F p-valor.
Entre grupos 2310,255 4 577,564 3758,892 0,000
Dentro de los grupos 6,914 45 0,154
Total 2317,169 49
Fuente: Elaboración propia
Interpretación:
Tabla 6, el análisis de datos mediante la prueba de ANOVA, permite determinar
diferencias significativas en los valores promedios y distribución de los grupos de
datos analizados, es decir confirma si los grupos de datos correspondientes a los
halos de inhibición presentan valores similares o no, al evaluar el p-valor obtenido
del análisis entre los grupos mediante ANOVA se obtuvo un valor de 0,00; por lo
que se confirma que existe al menos uno de los grupos
Tabla 7. Análisis por subgrupos homogéneos
Diámetro de inhibición
HSD Tukeya
Grupos de trabajo N Subconjunto para alfa = 0.05
1 2 3 4 5
Control negativo (etanol 70°) 10 6,22
Ext. Paico   - 50% 10 11,11
Ext. Paico    - 75% 10 12,62
Ext. Paico  - 100% 10 13,13
Control Positivo (ciprofloxacino) 10 26,63
Sig. 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000
“Se visualizan las medias para los grupos en los subconjuntos homogéneos”.
a. “Utiliza el tamaño de la muestra de la media armónica = 10,000”.
Fuente: Elaboración propia
31
Interpretación:
Tabla 7, muestra el análisis de los datos agrupados por subgrupos homogéneos,
mediante la prueba de Tukey que permite complementar el análisis de ANOVA y
nos muestra los resultados comparativos por grupos y permite comparar el efecto
antibacteriano de los extractos hidroalcohólico Chenopodium ambrosioides L.
(Paico) y grupos control en relación al tamaño del halo de inhibición.
Decisión: Aceptar H1 y  rechazar  H0, por lo tanto, se confirma que el extracto
hidroalcohólico Chenopodium ambrosioides L. (Paico) presenta actividad
antibacteriana in vitro frente a Escherichia coli ATCC® 25922.
CONTRASTACIÓN DE LA HIPÓTESIS ESPECÍFICA 2:
H0: El extracto hidroalcohólico de las hojas de Chenopodium ambrosioides L.
(Paico) al 50%, 75% y 100% no presenta actividad antibacteriana in vitro frente a
Escherichia coli ATCC® 25922.
H1: El extracto hidroalcohólico de las hojas de Chenopodium ambrosioides L.
(Paico) al 50%, 75% y 100% presenta actividad antibacteriana in vitro frente  a
Escherichia coli ATCC® 25922.
Tabla 8. Análisis de la varianza (ANOVA)
Diámetro del halo de inhibición
Suma de cuadrados df Media al cuadrado    F    p-valor.
Entre grupos 2310,255 4 577,564 3758,892 0,000
Dentro de los grupos 6,914 45 0,154
Total 2317,169 49
Fuente: Elaboración propia
Interpretación:
Tabla 8, el análisis de datos mediante la prueba de ANOVA, permite determinar
diferencias significativas en los valores promedios y distribución de los grupos de
los datos de los grupos experimentales con el control negativo, es decir, confirma
si los grupos de datos en estudio correspondientes a los halos de inhibición
presentan valores similares o no, al evaluar el p-valor obtenido del análisis entre los
grupos mediante ANOVA se obtuvo un valor de 0,00; por lo que se confirma que
32
existe al menos uno de los grupos.
Tabla 9. Análisis por sub grupos homogéneos
HSD Tukeya
Grupos de trabajo N
1 2 3 4
Control negativo (etanol 70°) 10 6,22
Ext. Paico   - 50% 10 11,11
Ext. Paico    - 75% 10 12,62
Ext. Paico  - 100% 10 13,13
Sig. 1,000 1,000 1,000 1,000
Fuente: Elaboración propia
Interpretación:
En la tabla 9, se observa la prueba inferencial de Tukey, que permite confirmar las
diferencias estadísticamente significativas relacionándolas entre sí, luego del
análisis realizado se observa diferente actividad antibacteriana en todos los grupos
de datos comparados con el grupo control negativo.
Decisión: Rechazar H0 y aceptar H1 que confirma que el extracto hidroalcohólico
de las hojas de Chenopodium ambrosioides L. (Paico) al 50%, 75% y 100%
presenta actividad antibacteriana in vitro frente a Escherichia coli ATCC® 25922.
CONTRASTACIÓN DE LA HIPÓTESIS ESPECÍFICA 3:
H0: El extracto hidroalcohólico de Chenopodium ambrosioides L. (Paico) no
presenta mayor actividad antibacteriana in vitro que el ciprofloxacino frente a
Escherichia coli ATCC® 25922.
H1: El extracto hidroalcohólico de Chenopodium ambrosioides L. (Paico) presenta
mayor actividad antibacteriana in vitro que el ciprofloxacino frente a Escherichia coli
ATCC® 25922.
33
Tabla 10. Análisis de la varianza (ANOVA)
Diámetro del halo de inhibición
Suma de cuadrados df Media al cuadrado F p-valor.
Entre grupos 2310,255 4 577,564 3758,892 0,000
Dentro de los grupos 6,914 45 0,154
Total 2317,169 49
Fuente: Elaboración propia
Interpretación:
Tabla 10, el análisis de datos mediante la prueba de ANOVA, permite determinar
diferencias significativas en los valores promedios y distribución de los datos de los
grupos experimentales con el control positivo, es decir, confirma si los grupos de
datos en estudio correspondientes a los halos de inhibición presentan valores
similares o no, al evaluar el p-valor obtenido del análisis entre los grupos mediante
ANOVA se obtuvo un valor de 0,00; por lo que se confirma que existe al menos uno
de los grupos.
Tabla 11. Análisis por sub grupos homogéneos
Diámetro de inhibición
HSD Tukeya
Grupos de trabajo N Subconjunto para alfa = 0.05
1 2 3 4 5
Ext. Paico   - 50% 10 11,11
Ext. Paico    - 75% 10 12,62
Ext. Paico  - 100% 10 13,13
Control Positivo (ciprofloxacino) 10 26,63
Sig. 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000
Se visualizan las medias para los grupos en los subconjuntos homogéneos.
a. Utiliza el tamaño de la muestra de la media armónica = 10,000.
Fuente: Elaboración propia
Interpretación:
Tabla 11, muestra el análisis de los datos agrupados por subgrupos homogéneos,
mediante la prueba de Tukey que permite complementar el análisis de ANOVA y
nos muestra los resultados comparativos por grupos y permite comparar el efecto
antibacteriano de los extractos hidroalcohólico Chenopodium ambrosioides L.
(Paico) y el grupo control positivo en relación al tamaño del halo de inhibición
34
mediante la prueba de Tukey, se procedió a confirmar las diferencias
estadísticamente significativas relacionándolas entre sí, observando que el grupo
control positivo (ciprofloxacino) presenta mayor actividad antibacteriana que los
grupos experimentales.
Decisión: Aceptar H0 y rechazar H1 que confirma que el extracto hidroalcohólico
de Chenopodium ambrosioides L. (Paico) no presenta mayor actividad
antibacteriana in vitro que el ciprofloxacino frente a Escherichia coli ATCC® 25922.
Tabla 12. Evaluación de la sensibilidad antibacteriana de Escherichia coli
ATCC® 25922 mediante Duraffourd
Altamente
Sensibilidad nula Sensible Muy sensible
Tratamiento sensible
< 8 mm 8–14 mm 14-20 mm
> 20 mm
Control negativo (etanol 70°) 6,22
Ext. Paico   - 50% 11,11
Ext. Paico    - 75%  12,62
Ext. Paico  - 100%  13,13
Control Positivo 26,63
(ciprofloxacino)
Fuente: Elaboración propia
Interpretación:
Tabla 12, la escala de Durafourd permite comparar la sensibilidad de la bacteria
Escherichia coli ATCC® 25922 a los grupos en estudio (experimentales y control)
clasificando esta sensibilidad de la bacteria según el tamaño del halo de inhibición
formado, para el caso se observa que Escherichia coli presenta sensibilidad nula al
grupo control negativo, es sensible al extracto de paico al 50%, 75% y 100% y es
altamente sensible al control positivo (ciprofloxacino).
35
IV. DISCUSIÓN
4.1. Discusión de resultados
Las infecciones bacterianas siempre han sido una problemática en el sector
salud, sobre todo con el incremento de la resistencia microbiana en las
últimas décadas, esta situación ha llevado a la búsqueda mediante
investigaciones de nuevas moléculas o alternativas que permitan detener o
disminuir el incremento de la resistencia bacteriana, sobre todo en las
bacterias como Escherichia coli, que ha demostrado altos índices de
resistencia y contagio, en tal sentido, la presente investigación muestra a
continuación la discusión de los resultados obtenidos con otros autores,
según los objetivos planteados.
Con respecto a los metabolitos secundarios encontrados en el extracto
hidroalcohólico de las hojas de Chenopodium ambrosioides L. (Paico) se
identificó compuestos fenólicos en alta cantidad (+++), quinonas y
triterpenos en mediana cantidad (++) y baja cantidad (+) de alcaloides y
mucílago; así mismo, los resultados obtenidos por Tchani G. et al (2021),
en su estudio fitoquímico realizado a los extractos acuosos y etanólicos de
las hojas y semillas de Chenopodium ambrosioides identificaron la
presencia en ambos extractos de flavonoides, taninos, terpenoides,
terpenos y en el extracto acuoso además se encontró alcaloides; ambos
estudios coinciden en la presencia de triterpenos y alcaloides por la
similitud que presentan los extractos con respecto a los solventes
empleados, ya que en nuestro estudio se empleó una mezcla de etanol y
agua, por otro lado, no se pudo extraer flavonoides y taninos que son
extraídos más fácilmente con etanol puro; similar estudio muestra Guzmán
E. et al (2021) en su investigación sobre el estudio fitoquímico del extracto
etanólico de Chenopodium ambrosioides L. “Paico”, donde determinaron la
presencia de flavonoides, compuestos fenólicos, taninos, triterpenos,
lactonas y alcaloides, al igual que el estudio anterior realizado por Tchani
G. et al (2021), estos estudios junto con el nuestro corroboran sus
resultados obtenidos, los cuales muestran las propiedades inherentes de la
planta (metabolitos) que brindan su potencial actividad antibacteriana.
36
Con respecto a la determinación de la actividad antibacteriana in vitro del
extracto hidroalcohólico al 50%, 75% y 100% de las hojas de Chenopodium
ambrosioides L. (Paico) frente a Escherichia coli ATCC® 25922 esta fue
evaluada mediante el método de difusión donde se obtuvieron halos de
inhibición promedio de 11,11mm; 12,62mm y 13,13mm respectivamente, el
control negativo fue de 6,22mm; al comparar los halos de inhibición de los
extractos Chenopodium ambrosioides, con el grupo control negativo se
deduce que el extracto de dicha planta presenta actividad antibacteriana a
las concentraciones de estudio, lo que se contrasta al estudio realizado por
Sanchez S. et al (2016), donde determinaron de manera similar el efecto
antibacteriano del extracto hidroalcohólico de las hojas de Chenopodium
ambrosioides (paico) frente a cepas de Staphylococcus aureus y
Escherichia coli, aplicando el método de la concentración mínima inhibitoria
(CMI) observando actividad inhibitoria contra esta bacteria, así mismo,
Izquierdo, H (2016) evidenció el mismo efecto del extracto sobre
Escherichia coli encontrando un halo de inhibición promedio de 15 mm para
la concentración al 100%, valor que se asemeja a lo encontrado en nuestro
estudio; por otro lado, el estudio también realizado por Althobaiti F (2020)
sobre la evaluación del extracto de las hojas de Chenopodium
ambrosioides frente a hongos, bacterias Gram (+) y Gram (-) como P.
vulgaris y E. coli mediante el método de difusión en pozo, mostraron halos
de inhibición promedio para estos microorganismos de 10mm para P.
vulgaris y para E. coli halo de 15mm; los resultados encontrados por
distintos autores y el nuestro confirman la actividad antibacteriana que
presenta Chenopodium ambrosioides frente a Escherichia coli, mostrando
valores similares con respecto a los halos de inhibición formados bajo la
misma metodología empleada, del mismo modo, otro estudio que evidenció
la actividad antibacteriana de esta planta contra Escherichia coli pero en su
forma de aceite esencial, fue el realizado por Santiago J. et al (2016), en
Brasil quienes evaluaron la actividad antibacteriana del aceite esencial
de Chenopodium ambrosioides L., demostrando que este posee actividad
antibacteriana tanto para bacterias Gram negativas y positivas, para lo cual
aplicó el método de Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) la que se
encontró entre 62,5 a 250μL/mL en las cepas estudiadas; también Guzmán
E. et al (2021) evaluó la actividad antibacteriana del extracto etanólico de
37
las hojas de Chenopodium ambrosioides L. “Paico” observando que este
formó un halo de inhibición promedio mediante el método de difusión en
disco de 8,86 + 0,25mm, de manera general podemos decir que
Chenopodium ambrosioides presenta actividad antibacteriana a las
concentraciones del 100%, 75% y 50% como lo corroboran diferentes
estudios en sus extractos etanólicos, acuosos, hidroalcohólicos inclusive su
aceite esencial; con respecto a la corteza y fruto también fue evaluada en
forma de macerados acuoso y metanólico para determinar su actividad
antibacteriana frente a Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus y
Aspergillus niger (mm) no existiendo ninguna actividad en los extractos
acuoso, pero si los extractos metanólicos frente a los microorganismos
estudiados.
Por otro lado, al comparar la actividad antibacteriana in vitro del extracto
hidroalcohólico de Chenopodium ambrosioides L.  (Paico)  con
ciprofloxacino frente a Escherichia coli ATCC® 25922 mediante el análisis
estadístico de los datos obtenidos se confirmó que el ciprofloxacino
presenta mayor actividad antibacteriana in vitro que el extracto
hidroalcohólico de Chenopodium ambrosioides L. (Paico) a diferentes
concentraciones frente a Escherichia coli ATCC® 25922; así mismo,
aplicando la escala de Duraffourd donde se evaluó la sensibilidad
antibacteriana que presenta Escherichia coli a los extractos
hidroalcóholicos de Chenopodium ambrosioides L. (Paico), se puede
apreciar que Escherichia coli es altamente sensible al control positivo
(ciprofloxacino) y es sensible al extracto de paico al 50%, 75% y 100%,
confirmando del mismo modo, que ciprofloxacino tiene mayor efecto que
los extractos de Chenopodium ambrosioides, estos resultados también
fueron confirmados por Izquierdo (2016) en su investigación sobre la misma
planta, cabe mencionar que ciprofloxacino es una molécula sintética de una
concentración específica y demostrada para poseer actividad
antibacteriana sobre este tipo de microorganismos, razón por la cual,
presenta mayor actividad que los extractos de la planta estudiada.
38
4.2. Conclusiones
- Se determinó la actividad antibacteriana in vitro del extracto
hidroalcohólico de las hojas de Chenopodium ambrosioides L. (Paico)
frente a Escherichia coli ATCC® 25922.
- Los metabolitos secundarios encontrados en el extracto hidroalcohólico
al 50%, 75% y 100% de las hojas de Chenopodium ambrosioides L.
(Paico) mediante la marcha fitoquímica fueron los compuestos fenólicos
(+++), triterpenos (++) y alcaloides (+).
- Los extractos hidroalcohólicos al 50%, 75% y 100% de las hojas de
Chenopodium ambrosioides L. (Paico) presentaron actividad
antibacteriana in vitro valorados mediante halos de inhibición promedio
de 11,11mm, 12,62m y 13,13mm frente a Escherichia coli ATCC®
25922.
- Al comparar la actividad antibacteriana se evidencia que el
ciprofloxacino presenta mayor halo de inhibición (26.63mm) en
comparación del extracto hidroalcohólico de Chenopodium
ambrosioides L. (Paico) con 13.13mm; por lo tanto, presenta, mayor
actividad antibacteriana.
39
4.3. Recomendaciones
- Fomentar por medio de las instituciones educativas la búsqueda a
problemas de salud mediante los estudios experimentales sobre todo
fuente de recursos las plantas medicinales.
- Evaluar la aplicabilidad de los metabolitos secundarios obtenidos en las
plantas medicinales como recursos para nuevas investigaciones en
animales y posteriormente en estudios clínicos.
- Promover el uso de las plantas medicinales como recurso inicial para el
tratamiento de infecciones producidas por microorganismos.
- Comparar la actividad antibacteriana de Chenopodium ambrosioides L.
(Paico) frente a diferentes antibióticos y microorganismos.
40
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44
ANEXOS
45
Anexo 1. Instrumento de recolección de datos del estudio fitoquímico del extracto.
INSTRUMENTO DE RECOLECCIÓN DE DATOS PARA EL ESTUDIO FITOQUÍMICO
DEL EXTRACTO HIDROALCOHÓLICO DE LAS HOJAS DE Chenopodium ambrosioides
L. (PAICO)
OBJETIVO: Identificar los metabolitos secundarios presentes en el extracto hidroalcohólico
de las hojas de Chenopodium ambrosioides L. (PAICO).
MÉTODO: Metodología cualitativa de Olga Lock.(1968).
Prueba Metabolitos Color/ Resultados
Precipitado
Shinoda Flavonoides
amarillo +
Tricloruro férrico Compuestos
fenólicos Azul violeta +++- -
Taninos
Dragendorff Alcaloides Naranja ladrillo +
Bortanger Quinonas rojo ++
Liebermann - Triterpenos y
Burchard esteroides Anillo verde-azulado ++
Espuma Saponinas - -
Test Mucílago Mucílago - +
    Fuente: Propia
                Leyenda:
● Alta : +++
● Media : ++
● Baja : +
● Ausencia : -
46
Anexo 2. Instrumento de recolección de datos de la actividad antibacteriana
INSTRUMENTO DE RECOLECCIÓN DE DATOS PARA DETERMINAR LA
ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA IN VITRO DEL EXTRACTO HIDROALCOHÓLICO
DE LAS HOJAS DE Chenopodium ambrosioides L. (PAICO) FRENTE a Escherichia
coli ATCC® 25922
OBJETIVO: Identificar la actividad antibacteriana in vitro de las concentraciones del extracto
hidroalcohólico al 50%, 75% y 100% frente a cepas de Escherichia coli ATCC® 25922.
MÉTODO: Método de difusión en agar en pozo, basado en los fundamentos de Kirby & Bauer,
recomendados por el subcomité de ensayo de susceptibilidad (NCCLS) de los Estados Unidos
y la USP 41 en su apartado 81.
GRUPOS EXPERIMENTALES
Número  “ GRUPOS
de placas Concentraciones del extracto hidroalcohólico CONTROL
de las hojas de Chenopodium ambrosioides L.
(PAICO)
Control Control
100% 75% 50% Negativo positivo
(etanol 70°) (ciprofloxacino)
Placa N°01 13,55 11,98 11,02 6,43 29,99
Placa N°02 12,83 13,19 11,58 6,35
27,47
Placa N°03 13,33 12,34 11,06 5,88 28,74
Placa N°04 12,97 12,52 11,32 6,13 26,18
Placa N°05 13,09 12,59 10,97 5,34 26,68
Placa N°06 13,12 12,29 11,17 5,26 25,38
Placa N°07 12,89 12,82 11,03 6,34 26,54
Placa N°08 13,30 12,56 10,87 6,37 26,96
Placa N°09 13,02 13,20 11,03 7,02 24,94
Placa N°10 13,18 12,73 11,05 7,04 26,51
Media de los 13,13 12,62 11,11 6,22 26,63
halos
Fuente: Duraffourd y Lapraz (1986)
Leyenda:
● Nulo (-) ≤ 8mm
● Poco sensible (+)    8mm-14mm
● Sensible (++) > 14 mm-20mm
● Muy sensible (+++) > 20mm
47
Anexo 3. Matriz de consistencia
Formulación del problema Objetivos Hipótesis
Problema General Objetivo General Hipótesis General
¿Cuál es la actividad antibacteriana in vitro del Determinar la actividad antibacteriana in vitro El extracto hidroalcohólico de las hojas de
extracto hidroalcohólico de las hojas de del extracto hidroalcohólico de las hojas de Chenopodium ambrosioides L. (Paico) presenta
Chenopodium ambrosioides L. (Paico) frente a Chenopodium ambrosioides L. (Paico) frente a actividad antibacteriana in vitro frente a Escherichia
Escherichia coli ATCC® 25922? Escherichia coli ATCC® 25922. coli ATCC® 25922.
Problemas Específicos Objetivos Específicos Hipótesis Específicas
¿Cuáles son los metabolitos secundarios Identificar los metabolitos secundarios Existen los metabolitos secundarios presentes en
presentes en el extracto hidroalcohólico de las presentes en el extracto hidroalcohólico de las el extracto hidroalcohólico de las hojas de
hojas de Chenopodium ambrosioides L. hojas de Chenopodium ambrosioides L. (Paico). Chenopodium ambrosioides L. (Paico).
(Paico)?
¿Cuál será la actividad antibacteriana in vitro del Determinar la actividad antibacteriana in vitro El extracto hidroalcohólico de las hojas de
extracto hidroalcohólico al 50%, 75% y 100% de del extracto hidroalcohólico al 50%, 75% y 100% Chenopodium ambrosioides L. (Paico) al 50%,
las hojas de Chenopodium ambrosioides L. de las hojas de Chenopodium ambrosioides L. 75% y 100% presenta actividad antibacteriana in
(Paico) frente a Escherichia coli ATCC® 25922? (Paico) frente a Escherichia coli ATCC® 25922. vitro frente a Escherichia coli ATCC® 25922.
¿Cuál será la actividad antibacteriana in vitro del Comparar la actividad antibacteriana in vitro del El extracto hidroalcohólico de Chenopodium
extracto hidroalcohólico de Chenopodium extracto hidroalcohólico de Chenopodium ambrosioides L. (Paico) presenta mayor actividad
ambrosioides L. (Paico) comparada con ambrosioides L. (Paico) con ciprofloxacino antibacteriana in vitro que el cirprofloxacino frente
ciprofloxacino frente a Escherichia coli ATCC® frente a Escherichia coli ATCC® 25922. a Escherichia coli ATCC® 25922.
25922?
48
Anexo 4. Operacionalización de las variables
DEFINICIÓN CONCEPTUAL DEFINICIÓN DIMENSIONES INDICADORES ESCALA DE
VARIABLES OPERACIONAL MEDICIÓN N° DE VALOR
ÍTEMS
Variable independiente *Flavonoides
Extracto hidroalcohólico Sustancia que contiene los Método: Maceración Marcha
*Alcaloides 1+,
fitoquímica *Taninos nulo (0) 6 2+,de las hojas de principios activos de las con etanol 70°. *Terpenos escaso (1+) 3+
Chenopodium plantas los cuales han sido (MetabolitosSecundarios) *Quinonas Regularambrosioides L. extraídos por medio de *Compuestos Abundante
(PAICO). maceración. *fenólicos
Concentración
del extracto de Razón
3 100
75
las hojas. *Porcentaje( 50
%)
Variable dependiente ≤ 8mm
Actividad antibacteriana Proceso de disminución o (-)
in vitro sobre Escherichia muerte de la bacteria Método de difusión en  8mm-
coli ATCC® 25922. Escherichia coli ATCC® 25922 pozo, con medición de
por medio de un agente los halos de inhibición. 14mm
antibacteriano. Diámetros de Nulo (-)halos:Escala (+)Poco
Halo de de Duraffourd sensible 4 > 14
inhibición (mm) y Lapraz. Sensible mm-
Muy sensible
20mm
(++)
> 20mm
: (+++)
49
Anexo 5. Certificado botánico
Anexo 6. Certificado ATCC® de análisis de Escherichia coli

Anexo 7. Evidencias del trabajo realizado
Figura 2. Recolección de la planta
Figura 3. Extracción de las hojas y selección de la muestra
Figura 4. Lavado, desinfección y secado a temperatura ambiente de las
hojas
Figura 5. Secado y deshidratación en estufa de las hojas de paico
Figura 6. Pulverizado de las hojas de paico
Figura 7. Maceración del pulverizado de las hojas de paico
Figura 8. Filtración y evaporación del solvente
Figura 9. Obtención del extracto seco de la especie vegetal
Figura 10. Marcha fitoquímica
Figura 11. Activación de la cepa
Figura 12. Preparación del cultivo bacteriano
Figura 13. Sembrado del cultivo en placa
Figura 14. Preparación de pozos en agar e identificación
Figura 15. Aplicación del extracto de paico a diferentes concentraciones
sobre agar
Figura 16. Recolección de datos de la ciprofloxacina
Figura 17. Recolección de datos de los extractos de Paico