FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA DEL EXTRACTO
GLICÓLICO DE LAS HOJAS DE Synadenium grantii
Hook (Árbol de la Vida), SOBRE CEPAS DE Escherichia
coli ATCC 8739 IN VITRO.
TESIS PARA OPTAR EL TÍTULO PROFESIONAL DE QUÍMICO
FARMACÉUTICO
AUTORES:
Bach.  AROTAYPE CHOQUEHUANCA, MARILÚ
https://orcid.org/0000-0002-7846-1873
Bach.  CHAMBILLA ALVAREZ, CARMEN LISBETH
https://orcid.org/0000-0003-1928-4819
ASESOR
Mg.  FLORES LÓPEZ, OSCAR BERNUY
https://orcid.org/ 0000-0001-9091-2537
LIMA- PERÚ
2022
DEDICATORIA
A Dios que es mi fortaleza y guía en mi vida, mi
Madre que desde el cielo me inspira a seguir
adelante en mis metas, mi Padre y hermanos que
han sido mis pilares para concluir esta tesis, a mis
amigos y compañeros quienes compartieron sus
conocimientos gratuitamente.
Marilú Arotaype Choquehuanca
A Dios, A la Virgen de Copacabana, por darme las
fuerzas necesarias para poder acabar mi carrera
satisfactoriamente.
A mis padres Jorge y Ana, y a mis hermanos, por
ser mi apoyo y guía en cada día de la vida, por ser
el motivo que me impulsa a seguir con mis sueños y
metas a lograr.
A todas aquellas personas que de alguna manera
me dan fuerzas para seguir adelante y en especial a
TI, que me impulsaste a terminar mi carrera.
Carmen Lisbeth Chambilla Alvarez
2
AGRADECIMIENTO
A Dios, en primer lugar, por ser el guía de
nuestros caminos, por darnos las fuerzas
necesarias para continuar día a día y sobre
todo por permitirnos llegar a vivir este
momento tan importante de nuestras vidas,
para que nos bendiga en cada logro que
alcanzaremos.
Agradecer también a nuestros docentes,
amigos y familiares que estuvieron con
nosotros a lo largo de este camino.
3
ÍNDICE GENERAL
Páginas
RESUMEN 6
ABSTRACT 7
I. INTRODUCCIÓN 8
II. MATERIALES Y MÉTODOS 14
II.1 Enfoque y diseño de la investigación 14
II.2 Población, muestra y muestreo 14
II.3 Variables de la investigación 15
II.4 Técnicas e instrumentos para la recolección de datos 16
II.5 Plan metodológico para la recolección de datos 16
II.6 Procesamiento del análisis estadístico 20
II.7 Aspectos éticos 21
III. RESULTADOS 22
IV. DISCUSIÓN 27
IV.1 Discusión de resultados 27
IV.2 Conclusiones 30
IV.3 Recomendaciones 31
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 32
ANEXOS 39
ANEXO A: Instrumentos de recolección de datos 39
ANEXO B: Matriz de consistencia 42
ANEXO C: Operacionalización de las variables 43
ANEXO D: Constancia de estudio taxonómico de la especie vegetal 44
ANEXO E: Certificado de análisis de Escherichia coli ATCC 8739 45
ANEXO F: Evidencias fotográficas del trabajo de campo 46
4
ÍNDICE DE TABLAS
Páginas
Tabla 1. Resultados de la Prueba de Solubilidad 22
Tabla 2. Resultados de la Marcha Fitoquímica 23
Tabla 3. Resultados del Ensayo Microbiológico del extracto glicólico de
las hojas de Synadenium grantii Hook(Árbol de la vida) sobre cepas de
Escherichia coli ATCC 8739.       25
5
RESUMEN
Objetivo: Este estudio presenta como finalidad esencial, determinar la
actividad antibacteriana del extracto glicólico de las hojas de Synadenium
grantii Hook (Árbol de la vida) en cepas de Escherichia coli ATCC 8739.
Materiales y métodos: El análisis incluye un enfoque cuantitativo, de diseño
experimental y explicativo. En la parte experimental del estudio, se recolectaron
10 000 gramos de hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida) las
cuales se procedieron a limpiar, logrando obtener 1 000 gramos de hojas para
la elaboración del extracto, al cual se le realizaron las pruebas de solubilidad y
análisis fitoquímico. Para el ensayo microbiológico, se utilizó el método
propuesto por Kirby Bauer de difusión en agar, en el cual se usaron las
siguientes concentraciones del extracto glicólico al 25%,50%,75% y 100%,
como control negativo agua destilada y como control positivo Neomicina 30
ug/ml, sobre cepas de Escherichia coli ATCC 8739.
Resultado: En cuanto a los resultados del ensayo de solubilidad, se observó
una afinidad del extracto glicólico de las hojas de Synadenium grantii Hook
(Árbol de la vida) por el agua destilada, indicándonos que presenta una
característica muy soluble, asimismo se obtuvo como resultado soluble a los
solventes alcohólicos como: etanol, metanol, butanol, finalmente el solvente de
naturaleza apolar cloroformo que presentó insolubilidad.
En la marcha fitoquímica del extracto glicólico de las hojas de Synadenium
grantii Hook (Árbol de la vida), se logra observar una reacción muy evidente
de: flavonoides, taninos, fenoles y alcaloides para la reacción de Wagner. En el
ensayo microbiológico, se obtuvo como resultado una medición de 6 mm de
diámetro en los halos de inhibición para las concentraciones utilizadas en el
tiempo que se reportó.
Conclusión: Después del estudio realizado se concluye que el extracto glicólico
de las hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida) muestra ausencia
de actividad antibacteriana en relación al control positivo y negativo, frente a
cepas de Escherichia coli ATCC 8739, luego de 24 horas.
Palabras claves: Actividad antibacteriana, Escherichia coli, Synadenium grantii
Hook (Árbol de la vida).
6
ABSTRACT
Objective: The essential purpose of this study is to determine the antibacterial
activity of the glycolic extract of the leaves of Synadenium grantii Hook (Tree of
Life) on Escherichia coli ATCC 8739 strains.
Materials and methods: The analysis includes a quantitative approach, with an
experimental and explanatory design. In the experimental part of the study,
10,000 grams of leaves of Synadenium grantii Hook (Tree of Life) were
collected, which were cleaned, obtaining 1,000 grams of leaves for the
elaboration of the extract, to which the following tests were carried out. solubility
tests and phytochemical analysis. For the microbiological test, the method
proposed by Kirby Bauer of diffusion in agar was used, in which the following
concentrations of glycolic extract were used at 25%, 50%, 75% and 100%, as
negative control distilled water and as control positive Neomycin 30 ug/ml, on
Escherichia coli strains ATCC 8739.
Result: Regarding the results of the solubility test, an affinity of the glycolic
extract of the leaves of Synadenium grantii Hook (Tree of life) for distilled water
was observed, indicating that it has a very soluble characteristic, also it was
obtained as a result soluble at alcoholic solvents such as: ethanol, methanol,
butanol, finally the solvent of apolar nature, chloroform, which presented
insolubility.
In the phytochemical process of the glycolic extract from the leaves of
Synadenium grantii Hook (Tree of Life), a very evident reaction of: flavonoids,
tannins, phenols and alkaloids for the Wagner reaction is observed. In the
microbiological test, a measurement of 6 mm diameter was obtained in the
inhibition halos for the concentrations used in the reported time.
 Conclusion: After the study carried out, it is concluded that the glycolic extract
of the leaves of Synadenium grantii Hook (Tree of life) shows an absence of
antibacterial activity in relation to the positive and negative control against the
strains of Escherichia coli ATCC 8739, after 24 hours.
Keywords: Antibacterial activity, Escherichia coli, Synadenium grantii Hook
(Tree of life).
7
I. INTRODUCCIÓN
La propagación de las diversas afecciones al organismo es producida por
bacterias altamente contagiosas las cuales han expuesto y puesto en peligro la
Salud Pública, por tal motivo se dan nuevas oportunidades al estudio de
nuevas fuentes naturales que tengan como consecuencia la disminución de la
multiplicación bacteriana, hallando así en las plantas medicinales metabolitos
secundarios para este propósito.
Escherichia coli (E. coli) es un microorganismo que ocasiona en la mucosa del
intestino un perjuicio histológico. La estructura de este procedimiento es muy
perjudicial y complicada. Cuando se sitúan en el interior del intestino este
microorganismo se multiplica a brevedad posible y empiezan a fijarse unas con
otras logrando conformar una pequeña colonia, luego esta mediante su
extremidad alargada inserta aminoácidos con los cuales debilitan y reducen las
funciones primordiales del cuerpo humano. Este microorganismo logra fijarse
con fortaleza y seguridad, modificando toda la estructura de las células
epiteliales que protegen el interior del intestino delgado.
En nuestro país el uso medicinal de las plantas se remonta desde tiempos
antiguos los cuales se transmitieron por medio de la cultura y costumbres de
nuestros antepasados, utilizando las partes aéreas de las plantas. Este uso se
fundamenta en los principios activos que contiene la planta permitiendo
prevenir numerosas enfermedades que perjudican al hombre.
Las plantas medicinales son consideradas durante los últimos años como un
recurso para restaurar y preservar la salud por sus principios activos, esto se
debe a la práctica que se realiza en lugares rurales del país, convirtiéndose en
un gran potencial en la búsqueda de nuevos medicamentos, cura de ciertas
enfermedades, teniendo en cuenta que muchas de estas, todavía no han sido
estudiadas.
La importancia del presente trabajo de investigación se basa en proporcionar a
la población un óptimo entendimiento de la planta medicinal Synadenium grantii
Hook (Árbol de la vida), permitiendo contribuir nuevos y mejores beneficios
terapéuticos, brindando información en cuanto a la eficacia y menores
8
reacciones adversas de las plantas medicinales frente a los fármacos de origen
químico.
Por consiguiente, se plantea la investigación de la evaluación de la actividad
antibacteriana del extracto glicólico de las hojas del Synadenium grantii Hook
(Árbol de la vida). Este estudio dará aportes nuevos de las plantas medicinales
al conocimiento de la población.
El presente trabajo pretende evaluar la actividad antibacteriana del extracto
glicólico de las hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida) junto a ello
primero se realizará un tamizaje fitoquímico para identificar los metabolitos
secundarios responsables de la actividad antibacteriana por evaluar, para así
poder comprobar la eficiencia o no de esta.
El intento por disminuir el uso excesivo de antibióticos, motiva a realizar
estudios antibacterianos a las plantas medicinales, ya que en la actualidad se
ha creado una gran resistencia frente a determinados microorganismos.
Entre los antecedentes de la investigación se dispone:
Laureano, H et al. (2021) El objetivo de investigación fue determinar el efecto
antibacteriano in vitro del látex de Synadenium grantii sobre cepas de
Escherichia coli. Primeramente, se procedió a realizar los ensayos de
solubilidad y de análisis fitoquímico siguiendo el método de Olga Lock. Mientras
que, para el ensayo microbiológico, se realizó el método de difusión en agar
propuesto por Kirby Bauer, utilizando las concentraciones del látex al 100%,
75%, 50% y 25 %, así como un control negativo y un control positivo que fue
ciprofloxacino de 5 ug. Según los resultados con el ensayo de solubilidad, el
agua destilada fue la única sustancia con la que la muestra   fue muy soluble,
durante el análisis fitoquímico se halló la presencia de alcaloides y saponinas.
En cuanto al ensayo microbiológico los halos de medición para todas las
concentraciones utilizadas, luego de las 24, 48 y 72 horas fueron de 6 mm de
diámetro en cada uno de los tiempos reportados. Concluyendo en que el látex
de Synadenium grantii no evidencia efecto antibacteriano sobre cepas de
Escherichia coli (31).
9
Cavero, A (2018) El objetivo de esta investigación fue la evaluación de la
actividad antibacteriana in vitro del látex del Árbol de la vida frente a cepas de
Escherichia coli. La población estuvo constituida por la cepa de E. coli, este
ejemplar fue una muestra conformada por 16 placas infectadas con la cepa en
estudio. Luego se prosiguió con el análisis de la actividad antimicrobiana en
tres diluciones al 75, 50 y 25 por ciento del látex del Árbol de la vida en cepas
de Escherichia coli; teniendo como resultado que la dilución al 100% obtuvo
una inhibición de 23.8 mm, el de 75% de 19.71 mm, el de 50% de 19.90 mm y
el de 25% de 18.2 mm. Examinados y estudiados los resultados se llega a la
conclusión que el látex del Árbol de la vida presenta actividad antimicrobiana
en cepas de Escherichia coli (8).
Rwegoshora, F (2021) El objetivo a estudiar fue aislar y probar el bioactivo
compuesto de Synadenium glaucescens obtenidos en la región de Njombe,
Tanzania. La extracción fue mediante el método Soxhlet, identificando
terpenoides y acetato de lupeol. Se usó el método difusión en pozos de agar
para probar la presencia de antimicrobianos obteniendo un MIC de 0.01 mg/mL
frente a Acinetobacter baumannii y Salmonella entérica y una inhibición de 27
mm frente a Candida tropicalis concluyéndose que Synadenium glaucescens
presenta actividad antibacteriana (7).
Miranda, A (2015) En el presente trabajo, se realizaron estudios: fitoquímico,
de actividad antibacteriana y citotóxica in vitro del látex de Euphorbia laurifolia
sobre patógenos dérmicos. La muestra de la especie vegetal se recolectó en la
parroquia de Cubijíes, ubicada en la provincia de Chimborazo. Posteriormente,
se realizó el estudio fitoquímico del látex de E. laurifolia mediante
Cromatografía en Capa Fina teniendo como resultado la presencia de gran
cantidad de compuestos terpénicos, en la evaluación de la actividad citotóxica
mediante el modelo de Artemia salina de la fracción terpénica soluble mediante
el empleo de dimetilsulfóxido   se determinó que la concentración letal media
(LC50) fue de 214,50 ppm en A. salina. Además, se comprobó mediante
diferentes métodos que el extracto hexánico del látex de E. laurifolia carece de
actividad antimicrobiana al utilizarse sobre patógenos dérmicos a la
concentración máxima de prueba de 5 mg/mL. Se concluye que los terpenos
identificados en el extracto hexánico del látex de E. laurifolia presentan
10
actividad citotóxica sobre A. salina, pero carecen de actividad antimicrobiana in
vitro (6).
Espinoza, C et al (2018) El objetivo de la investigación consistió en evaluar el
efecto antibacteriano in vitro del látex de Croton lechleri Müll. Arg. (Sangre de
grado) frente a Staphylococcus aureus. La muestra vegetal obtenida fue de 500
mL, recolectada en la provincia de Tingo María, Departamento de Huánuco. En
el análisis fitoquímico del látex Croton lechleri Müll. Arg. se identificó
compuestos químicos: carbohidratos, compuestos fenólicos, antocianinas,
catequinas, flavonoides, saponinas, polifenoles, iridoides, alcaloides,
triterpenos esteroides, aminoácidos y taninos. Para la determinación del efecto
antibacteriano in vitro se empleó el método de difusión en agar,
concentraciones del látex al 25%, 50%, 75%, 100%; control (+) Oxacilina y
control (-) agua destilada. Los resultados se determinaron en función a la
medida del diámetro de los halos de inhibición. Se concluyó que el látex Croton
lechleri Müll. Arg. Tiene efecto antibacteriano frente a Staphylococcus aureus
(29).
Espadero, M et al (2019) En el presente estudio se analizaron los compuestos
orgánicos extraídos de las hojas de la planta. Para el estudio fitoquímico se
analizaron los fenoles, taninos, saponinas, cumarinas, lactonas y flavonoides,
observándose resultados positivos para cada compuesto químico. El ensayo
microbiológico del extracto etanólico mostró un porcentaje de inhibición del
44% sobre Klebsiella pneumoniae y un 43% sobre Escherichia coli, y se
observó un resultado negativo de inhibición para Staphylococcus aureus.
Concluyendo que los extractos orgánicos de Euphorbia aff. viridis (Klotzsch
Garcke) Boiss. Presentaron actividad antimicrobiana. (30).
Por consiguiente, el presente trabajo posee una sustentación contemplativa,
puesto que se pudo acceder a una mayor información con respecto a los tipos
de metabolitos secundarios; los cuales son los encargados del efecto
terapéutico y la actividad antibacteriana presentes en el extracto glicólico con
relación a la cepa de Escherichia coli. Así mismo, surgirá una posibilidad de
que sea utilizada en un futuro como un producto antibacteriano con menores
efectos secundarios en los pacientes, de la misma forma dar a conocer el uso
de la planta de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida) como una especie
vegetal beneficiosa para la población.
11
Por otro lado, se formuló una justificación para dar a conocer a la sociedad la
cual se basa en la comprobación de la actividad antibacteriana que tienen las
hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida), siendo la población de
inferior economía la más beneficiada, teniendo una opción segura y económica
para el tratamiento de casos diagnosticados con la bacteria de estudio.
En la actualidad se realizan estudios en busca de nuevas terapias
antibacterianas como alternativa en los diferentes tratamientos de antibióticos
conocidos, esto se debe a la resistencia que presentan algunos
microorganismos alrededor del mundo. La resistencia antibacteriana se da
cuando los microorganismos experimentan variaciones logrando así que los
fármacos empleados en la cura de las afecciones ocasionados por estos dejen
de ser eficaces. Este es un problema de Salud Pública debido al impacto
directo en la salud y en la economía para tratar estas enfermedades.  Por
consiguiente, la OMS ha declarado la resistencia a los antibióticos como uno de
los problemas más importantes que enfrenta la salud humana en la medicina
moderna al constituir una de las mayores amenazas para la salud mundial
(10).
Por lo tanto, el presente trabajo de investigación tuvo como objetivo general
determinar la actividad antibacteriana del extracto glicólico de las hojas de
Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida) en cepas de Escherichia coli ATCC
8739.
Para ello se plantea como hipótesis general. El extracto glicólico de las hojas
de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida) tiene actividad antibacteriana
frente a cepas de Escherichia coli ATCC 8739.
12
II. MATERIALES Y MÉTODOS
II.1.-Enfoque y diseño de la investigación
Enfoque: El trabajo realizado tiene un enfoque cuantitativo; porque se llevó a
cabo diversas mediciones con respecto al diámetro referido por los halos
formados para la evaluación de la actividad antibacteriana del extracto glicólico
de las hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida).
Experimental: Se recurrió al uso de una variable independiente; el extracto
glicólico de las hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida), y a la vez
la variable dependiente; que es la actividad antibacteriana frente a cepas de
Escherichia coli ATCC 8739.
Transversal: Se recolectaron datos en una precisa ocasión y momento.
Explicativo: Se pretendió analizar las diferentes concentraciones del extracto
glicólico de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida) y su relación con la
actividad antibacteriana con respecto a las cepas de Escherichia coli ATCC
8739.
II.2.-Población, muestra y muestreo
II.2.1.-Población
La población vegetal está compuesta por 10 000 gramos de un eco tipo
cuidadosamente seleccionado de Synadenium grantii Hook (Árbol de la
vida), el cual fue adquirido en el distrito de La Joya -Majes – Pedregal del
Departamento de Arequipa a una altura de 1420 m.s.n.m.
En el estudio microbiológico se tuvo como población a las cepas del
microorganismo bacteriano Escherichia coli ATCC 8739.
II.2.2.-Muestra
Se utilizó como muestra 1000 gramos de las hojas de Synadenium grantii
Hook (Árbol de la vida).
13
Para el estudio microbiológico se tuvo como muestra las placas Petri de
Agar Mueller Hinton.
II.2.3.-Muestreo
-Criterios de inclusión
Hojas en buen estado, verdes y sanas.
-Criterios de exclusión.
Hojas amarillas, dañadas por hongos y organismos ajenos a la planta.
II.3.-Variables de investigación
II.3.1.-VARIABLE INDEPENDIENTE
Formada por el extracto glicólico de las hojas de Synadenium grantii
Hook (Árbol de la vida).
DEFINICIÓN CONCEPTUAL: Resultado obtenido a partir de la
maceración de las hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida)
por 15 días en agua y propilenglicol; a la vez concentrado y guardado,
posteriormente se administró en diferentes concentraciones.
DEFINICIÓN OPERACIONAL: Concentración del extracto glicólico de
las hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida).
INDICADORES: Concentraciones de los extractos
✔ 25%
✔ 50%
✔ 75%
✔ 100%.
II.3.2.-VARIABLE DEPENDIENTE
Actividad antibacteriana sobre cepas de Escherichia coli ATCC 8739.
14
DEFINICIÓN CONCEPTUAL: Facultad o capacidad de compuestos
químicos para impedir o eliminar el desarrollo y/o proliferación de
microorganismos.
DEFINICIÓN OPERACIONAL: Susceptibilidad bacteriana de los
microorganismos frente al extracto glicólico de las hojas de Synadenium
grantii Hook (Árbol de la vida), relacionados con la medición del halo de
inhibición conseguidos por el extracto.
INDICADORES: Escala de sensibilidad, según Duraffourd.
✔ Sensibilidad nula (-) menor a 8 mm
✔ Sensible (+) mayor a 8 mm
✔ Muy sensible (+ +) mayor a 14 mm
II.4.-Técnicas e instrumentos para la recolección de datos
La técnica que se utilizó fue la recolección de datos, la cual se basó
principalmente en la observación de la parte experimental, para lo cual se
empleó un vernier calibrado, en el cual se consignaron las respectivas medidas
del halo de inhibición.
Los resultados logrados se registraron en Fichas de recopilación para cada uno
de los procedimientos desarrollados: ensayo de solubilidad, tamizaje
fitoquímico y actividad antibacteriana.
II.5.-Plan metodológico para la recolección de datos
El método empleado en la recopilación de información, se basó en el método
de la constante percepción sin participación alguna, verificando la secuencia de
los procedimientos:
II.5.1.-Recolección y autenticación botánica
La muestra utilizada fue recolectada en el distrito de La Joya -Majes –
Pedregal del Departamento de Arequipa. Así mismo, se procuró
seleccionar y recolectar precavidamente las hojas de Synadenium grantii
15
Hook (Árbol de la vida), en buen aspecto, frescas, no deterioradas y libre
de microorganismos como hongos, insectos, etc.
El resultado de la identificación botánica de la muestra se obtuvo dentro
de las instalaciones del Instituto Científico Michael Owen Dillon (IMOD)
II.5.2.-Preparación del material vegetal
En el proceso de investigación se recaudaron 1.000 gramos de hojas
frescas de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida), para
posteriormente realizar el lavado y limpieza para lograr que la muestra
se encuentre libre de microorganismos o agentes contaminantes y
finalmente realizar el secado al medio ambiente por un periodo de 15
días calendario. Una vez que la muestra haya secado se procederá a
realizar el pulverizado y almacenamiento en la oscuridad.
II.5.3.- Obtención del extracto glicólico
Una vez alcanzado el peso equivalente de 100 gramos de hojas de
Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida). Luego se procederá a
realizar el macerado por 7 días con agua y propilenglicol, en una
proporción de 1:10; luego se procederá al filtrado del macerado y se
desechó la parte sólida.
Se trabajó con la parte líquida consiguiendo un acumulado de todos los
nutrientes del extracto glicólico de las hojas Synadenium grantii Hook
(Árbol de la vida).
II.5.4.- Prueba de solubilidad y análisis fitoquímico
Para llevar a cabo el ensayo de solubilidad del extracto de las hojas de
Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida), empleamos una serie de
solventes, luego se añadió 3 ml   del extracto glicólico y se adiciona 1 ml
de los diferentes solventes de naturaleza polar y apolar.
● 3 ml de Extracto glicólico de las hojas de Synadenium
grantii Hook (Árbol de la vida) + 1 ml Metanol
● 3 ml de Extracto glicólico de las hojas de Synadenium
grantii Hook (Árbol de la vida) + 1 ml Etanol
16
● 3 ml de Extracto glicólico de las hojas de Synadenium
grantii Hook (Árbol de la vida) + 1 ml Cloroformo
● 3 ml de Extracto glicólico de las hojas de Synadenium
grantii Hook (Árbol de la vida) + 1 ml Butanol
● 3 ml de Extracto glicólico de las hojas de Synadenium
grantii Hook (Árbol de la vida) + 1 ml Acetil cetona
● 3 ml de Extracto glicólico de las hojas de Synadenium
grantii Hook (Árbol de la vida) + 1 ml Agua destilada
En el análisis fitoquímico se empleó el método de Domínguez A y Lock O, el
cual se basa en la presencia o ausencia de metabolitos secundarios presentes
en la muestra vegetal, fundamentándose en reacciones químicas de coloración
y precipitación, utilizando los distintos reactivos a emplearse.
                 II.5.5.-Ensayo microbiológico
Para el control se utilizó cepas de Escherichia coli ATCC 8739, para el control
positivo se utilizaron los discos de sensibilidad del antibiótico de Neomicina 30
ug/mL, y el control negativo fue agua destilada.
● Medio de cultivo
Se empleó el Agar Mueller-Hinton, el cual se preparó conforme a
la información dada por el fabricante. Se empleó 15.2 g de agar
y se diluyó en 400 mL de agua destilada, con un pH de 7.2 - 7.4
con solución de NaOH al 0.1 N. Se esteriliza en autoclave a una
temperatura de 121 ° C por 15 minutos. Se dejó a T° aprox. de
40 °C - 45 °C y luego se prosiguió a plaquear, repartiendo el
medio de cultivo en las placas Petri estériles hasta 4 mm. Se
permite que solidifique el medio de cultivo por 20 minutos para
posteriormente refrigerar de 2 a 6 °C, para ser usado después.
● Elaboración del estándar (0,5 mc. Farland)
En cuanto al inóculo se añadió 99.5 ml de H2SO4 al 0.18 M. y 0.5
ml de BaCl2 al 0.048 M (solución acuosa) formándose un
precipitado de sulfato de Bario suspendido, esta es una fórmula
para aproximadamente 100 ml de agua destilada. Luego se
17
mezcla con insistente movimiento para conservar la suspensión.
Se continuó ajustando las tapas para almacenar en un sitio
oscuro a temperatura de 2 a 25 °C impidiendo el congelamiento
o sobrecalentamiento hasta el instante en que se usó.
- Dilución para las diversas concentraciones al 25 %, 50
%,75 % y 100% del extracto.
● Concentración al 25% = 2.5 ml de extracto glicólico y 7.5
ml de agua destilada.
● Concentración al  50% = 5 ml de extracto glicólico y 5 ml
de agua destilada.
● Concentración al 75% = 7.5 ml de extracto glicólico y 2.5
ml de agua destilada.
● Concentración al 100% = 10 ml de extracto glicólico y 10
ml de agua destilada.
- Preparación del inóculo,
 En un tubo colocar 4 a 5 ml de caldo Tripticasa Soya, luego se
añadió con un Asa de Kolie la cepa correspondiente.
Posteriormente para la incubación de este caldo requerimos una
temperatura de 35 °C a 37 °C, logrando la turbidez del estándar:
0,5 de la escala de Mc. Farland. La suspensión preparada
contendrá aproximadamente 1x108 UFC/ml para E. coli.
Seguidamente se llevó a cabo el sembrado del inóculo
bacteriano, después de los 15 minutos y con la turbidez del
inóculo apropiado. Por último, se distribuirá en la superficie de las
placas, logrando un estriado homogéneo del inóculo haciendo uso
del hisopo para mantener una distribución apropiada.
La preparación del inóculo es comparada con la escala
turbométrica de McFarland, la que se utiliza para este tipo de
ensayo.
18
 - Aplicación del extracto y disco de Neomicina en las
placas inoculadas
Utilizando un saco bocado de acero se procedió a realizar 4
pocillos a una distancia alterna en las 6 placas con un
diámetro de 6 mm con previa esterilización del mismo.
Posteriormente con unas jeringas de insulina estériles se
procedió a colocar 0.1 ml de extracto al 25%, 50% ,75% y
100%, en cada pocillo y los controles (positivo y negativo).
El ensayo para cada dilución se hizo seis veces:
● Grupo I: Neomicina 30 ug/ml (control positivo). Se
agregó un disco de antibiótico.
● Grupo II: Agua destilada (control negativo). Se añadió
0.04 ml a cada pocillo de sensibilidad.
● Grupo III:  Extracto  glicólico  de  las  hojas  de
Synadenium grantii Hook (Árbol  de la  vida)  al  25%: se
añadió 0.04 ml a cada pocillo de sensibilidad.
● Grupo IV: Extracto glicólico de las hojas de
Synadenium grantii Hook (Árbol  de la  vida)  al  50%: se
añadió 0.04 ml a cada pocillo de sensibilidad.
● Grupo V: Extracto glicólico de las hojas de Synadenium
grantii Hook (Árbol de la vida) al 75%: se añadió 0.04
ml a cada pocillo de sensibilidad.
● Grupo VI: Extracto glicólico de las hojas de
Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida) al 100%: se
agregó 0.04 ml a cada pocillo de sensibilidad.
- Incubación
 Realizada la siembra del inóculo en las placas, se llevará a la
estufa para su incubación a una temperatura de 37 °C.
19
- Medición de los halos de inhibición.
Se utilizó un vernier calibrado transcurrida las 24 horas para la
medición del diámetro de los halos de inhibición del
crecimiento de la cepa bacteriana.
II.6.-Procesamiento del análisis estadístico
La información obtenida en el presente trabajo de investigación se ingresó al
programa Excel y Word para la obtención de tablas estadísticas las cuales nos
permiten reforzar y solidificar toda la información reunida de las muestras
estudiadas comprobando las hipótesis en estudio.
II.7.- Aspectos éticos
Las reglas éticas nos señalan que los estudios experimentales deben cumplir
las normas de bioseguridad en el laboratorio de tal manera así resguardar la
integridad de los investigadores previniendo así el contacto con residuos.
La muestra utilizada es de origen vegetal y los análisis desarrollados en
nuestra investigación fueron con cepas de Escherichia coli ATCC 8739. Así
mismo debemos indicar que los procedimientos realizados se llevaron a cabo
con las normativas correspondientes al laboratorio de investigación, con las
limitaciones presentes por la coyuntura actual en la cual nos encontramos.
20
III. RESULTADOS
III.1.-Ensayo de Solubilidad
Tabla 1: Resultados de la prueba de solubilidad
N° SOLVENTES RESULTADO
1 ETANOL + +
2 METANOL + +
3 AGUA DESTILADA + + +
4 ACETIL CETONA +
5 CLOROFORMO -
7 BUTANOL + +
LEYENDA:
· INSOLUBLE (-)
· POCO SOLUBLE (+)
· SOLUBLE (++)
· MUY SOLUBLE (+++)
En la Tabla 1, se observan los resultados obtenidos, previamente de manera
ordenada se etiquetó a los tubos de ensayo con cada solvente a utilizar. En
cada tubo se introdujo 3 ml de extracto glicólico de las hojas de Synadenium
grantii Hook (Árbol de la vida), para posteriormente agregar 1 ml del solvente
(etanol, metanol, agua destilada, acetil cetona, cloroformo, butanol). Se agitó
cada tubo de ensayo y observamos los resultados de la prueba de solubilidad
por 10 minutos, asimismo se observó afinidad del extracto glicólico de las hojas
de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida) por el agua destilada, el cual es
un solvente polar, en el cual nos indica que presenta una característica muy
soluble, asimismo se obtuvo como resultado soluble a los solventes alcohólicos
como: etanol, metanol, butanol, finalmente el solvente  de naturaleza apolar
como es el cloroformo presentó insolubilidad.
21
III.2.- Marcha fitoquímica
Tabla 2: Resultados de la Análisis fitoquímico
MARCHA FITOQUÍMICA
PRINCIPIO PRUEBA MÉTODO RESULTADOS
ACTIVO
ANTOCIANINAS Prueba cualitativa Cualitativo +
Reacción de
Dragendorff Cualitativo ++
ALCALOIDES Reacción de Mayer Cualitativo +
Reacción de Wagner Cualitativo +++
LACTONAS Reacción  de Baljet Cualitativo ++
FLAVONOIDES Reacción de Cualitativo +++
Shinoda
CARDENOLIDOS Reacción de Kedde Cualitativo -
Reacción de Cualitativo +
ESTEROIDES Liebermann-
Burchard
SAPONINAS Reacción de Cualitativo +
espuma
Reacción de cloruro Cualitativo +++
TANINOS férrico
Reacción de Cualitativo
TRITERPENOS Liebermann- +
Burchard
Reacción de Cloruro Cualitativo +++
FENOLES férrico
LEYENDA:
· REACCIÓN MUY EVIDENTE (+++)
· REACCIÓN EVIDENTE (++)
· REACCIÓN POCO EVIDENTE (+)
· NO HUBO REACCIÓN (-)
22
En la Tabla 2, se puede observar los resultados obtenidos, de manera
ordenada y mediante un análisis cualitativo de la marcha fitoquímica del
extracto glicólico de las hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida), se
logra observar una reacción muy evidente de: flavonoides, taninos, fenoles y
alcaloides para la reacción de Wagner. Asimismo, en la prueba de Dragendorff
para alcaloides y Baljet para lactonas se observa una reacción evidente.
Finalmente se observa una reacción poco evidente para triterpenos, saponinas,
esteroides, antocianinas.
23
III.3.-Ensayo Microbiológico
TABLA 3: Resultados del ensayo microbiológico del extracto
glicólico de las hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol de la
Vida) frente a cepas clínicas de Escherichia coli ATCC 8739
EXTRACTO GLICÓLICO DE LAS HOJAS DE
MICROORGANISMO Synadenium grantii Hook (Árbol de la Vida)
LONGITUD DE HALOS DE INHIBICIÓN (mm)
TIEMPO DE INCUBACIÓN : 24 HORAS
NEOMICINA AGUA 25% 50% 75% 100%
30 ug/ml DESTILADA
Escherichia coli ATCC 19.16 6 6 6 6 6
8739
18.95 6 6 6 6 6
18.78 6 6 6 6 6
19.66 6 6 6 6 6
18.76 6 6 6 6 6
19.44 6 6 6 6 6
PROMEDIO 19.13 6 6 6 6 6
24
En la Tabla 3, se logra observar los resultados de los grupos del extracto
glicólico de las hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol de la Vida), frente al
control positivo que es la Neomicina 30 ug/ml, control negativo que es el agua
destilada, frente a cepas de Escherichia coli ATCC 8739.
Después del tiempo de incubación, en las concentraciones de 25%, 50%, 75%
y 100 %, se muestran halos de inhibición similares a 6 mm. Por lo tanto, este
resultado se deduce como ausencia de actividad antibacteriana del extracto
glicólico de las hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol de la Vida) frente a
cepas de Escherichia coli ATCC 8739, por la prueba de difusión Agar.
Para el control negativo (agua destilada) se logró evidenciar un halo de
inhibición de 6 mm.
Sin embargo, se logra evidenciar un promedio de halo de inhibición de 19.13
mm para el control positivo (Neomicina 30 ug/ml) después de 24 horas de
incubación.
25
IV. DISCUSIÓN
4.1 Discusión de resultados
Escherichia coli es un microorganismo Gram negativo, anaerobio facultativo
perteneciente a la familia Enterobacteriaceae, el cual posee cepas patógenas
que pueden causar daño ocasionando diversos cuadros clínicos. Según el
estudio realizado a las hojas de la especie vegetal Synadenium grantii Hook, al
cual se le hicieron varias pruebas para determinar su actividad antibacteriana
frente a cepas de Escherichia coli ATCC 8739, demostrando ausencia en
cuanto a actividad antibacteriana.
En cuanto a la prueba de solubilidad realizada al extracto, la cual se muestra en
la tabla 1, se constató que el agua destilada fue el solvente que tuvo mayor
solubilidad, demostrando que es un solvente polar, siendo poco soluble en
etanol, metanol, butanol y con el cloroformo no presentó solubilidad. En un
estudio realizado por Laureano et al (2021) demostraron que en la prueba de
solubilidad al látex de Synadenium grantii Hook dio como resultado que
presenta mayor solubilidad al agua destilada, también presentó mediana
solubilidad al cloroformo y diclorometano, teniendo escasa solubilidad hacia los
solventes butanol, etanol, metanol (31).
En el estudio de Espinoza et al (2018) realizaron un estudio de solubilidad al
látex de Croton lechleri Müll. Arg. Obteniendo los resultados: mayor solubilidad
al agua destilada y etanol 70°, medianamente soluble en éter, cloroformo (29).
El análisis fitoquímico realizado al extracto en estudio que se muestra en la
tabla 2, muestra que los metabolitos secundarios encontrados con mayor
evidencia son flavonoides, taninos, fenoles y alcaloides, con poca evidencia
están las antocianinas, esteroides, saponinas y triterpenos. Según Laureano et
al (2021) al realizar su ensayo encontró la presencia de metabolitos
secundarios al látex de Synadenium grantii Hook identificando mayor presencia
de alcaloides, saponinas que le dan posible actividad analgésica y citotóxica,
teniendo poca presencia de compuestos fenólicos, lactonas, antocianinas,
evidenciando ausencia de terpenos, esteroides, antraquinonas, taninos,
flavonoides (31).
Espinoza et al (2018) realizó la marcha fitoquímica al látex de Croton lechleri
Müll. Arg. Donde demostró mayor presencia de compuestos fenólicos,
26
flavonoides, antocianinas y catequinas, saponinas y polifenoles. En cuanto a la
presencia de metabolitos primarios presentes obtuvo poca presencia de
azúcares reductores y almidón (29).
Se observan diferencias según los estudios realizados, esto se puede presentar
porque la especie vegetal presenta metabolitos secundarios característicos de
su familia, pero difieren químicamente. Según nuestro estudio se encontró
metabolitos secundarios que no son responsables de dicha actividad en estudio
como los alcaloides pudiendo ser su mecanismo de acción mediante la
combinación del ADN y la pared celular del microorganismo, flavonoides a los
que se les atribuye actividad antiinflamatoria, antimicótica, antiviral, diurética,
anticancerígena, siendo estos de gran utilidad como iniciadores en la
composición de hormonas y corticoides en el sector farmacéutico según
Grández.
Asimismo, los resultados en la prueba microbiológica en la tabla 3 muestra que
las concentraciones de 25%, 50%,75% y 100 %, evidencian halos de inhibición
similares a 6 mm, a lo cual esto se comprende como carencia de actividad
antibacteriana del extracto glicólico de las hojas de Synadenium grantii Hook
(Árbol de la Vida) frente a cepas de Escherichia coli ATCC 8739, para el control
negativo (agua destilada) dio como resultado un halo de inhibición de  6 mm,
para el control positivo (Neomicina 30 ug/ml) se logra evidenciar un promedio
de halo de inhibición de 19.13 mm después de 24 horas de incubación. Estos
resultados se asemejan al estudio de Laureano et al (2021) al látex de
Synadenium grantii Hook, donde vio que el látex no mostró efecto
antibacteriano frente a cepas de Salmonella entérica, por la técnica de Kirby
Bauer in vitro (31).
De igual manera el estudio realizado por Lozada M. (2016) a la especie Croton
elegans Kunth (mosquera) sobre Staphylococcus aureus, Staphyloccocus
mutans, Streptococcus pneumoniae y Streptococcus pyogenes mediante la
técnica de Kirby Bauer no se mostraron resultados de actividad antibacteriana
(26). Otro estudio realizado por Godoy G. et al (2020) al espécimen Croton
gossypiifolius sobre cepas de Escherichia coli, Staphylococcus aureus,
Pseudomona aeruginosa no presentando inhibición sobre dichos
microorganismos (28). Según Guerrero M. (2019) realizó su estudio a la especie
de Sangre de grado y Tomillo frente a cepas de Staphylococcus aureus en un
27
estudio in vitro utilizando la técnica de Kirby Bauer en diferentes
concentraciones no presentando actividad antibacteriana sobre dicha bacteria
(27).
De los trabajos mencionados se desprende que coinciden con el resultado de
nuestro trabajo esto puede deberse a los diferentes microorganismos
empleados en los estudios, concentraciones y a las especies vegetales en
estudio.
En contraste con los trabajos mencionados citaremos estudios que sí
presentaron actividad antibacteriana teniendo en cuenta la familia a la que
pertenece nuestra planta, según el estudio realizado por Espinoza C. et al
(2018) al látex de Croton lechleri Mull.Arg. Sobre Staphylococcus aureus.
Emplearon la técnica de difusión en agar realizando para el estudio
concentraciones de 25%. 50%, 75%, 100%, como control positivo oxacilina y
control negativo agua destilada se tomó la lectura a las 24 horas, concluyendo
que si posee actividad antibacteriana (29). Otro estudio realizado por Cavero A.
(2018) al látex de Synadenium grantii Hook sobre Escherichia coli la cual
realizó concentraciones al 100%, 75%, 50%, 25% para el estudio concluyendo
que si presenta actividad antibacteriana (8). Asimismo, el estudio realizado por
Espadero M. et al (2019) a la especie vegetal de Euphorbia aff. Viridis (Klotzsch
& Garcke) Boiss. frente a Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae y
Escherichia coli donde se observó un porcentaje de 44% de inhibición frente a
Klebsiella pneumoniae, un 43% de inhibición para Escherichia coli, no
mostrando inhibición a Staphylococcus aureus concluyendo de esta manera
que el extracto si presenta efecto antibacteriano (30).
Los resultados del ensayo microbiológico pueden haber sido afectados por
múltiples factores como el lugar de recolección de la muestra, la humedad, la
temperatura, el clima, estructura de los suelos todo ello puede haber influido en
la composición de los metabolitos secundarios presentes en la planta.
28
IV.2 Conclusiones
 El extracto glicólico de las hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol de la
vida) muestra ausencia de actividad antibacteriana sobre cepas de
Escherichia coli ATCC 8739.
 Los metabolitos secundarios que evidenciaron el extracto glicólico de las
hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida) fueron alcaloides,
flavonoides, taninos y fenoles.
 Se determinó el ensayo microbiológico al extracto glicólico de las hojas
de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida) a las concentraciones de
25%, 50%, 75%, 100% sobre cepas de Escherichia coli ATCC 8739.
Obteniéndose resultados negativos.
 El estudio demuestra que el extracto glicólico de las hojas de
Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida) no posee actividad
antibacteriana comparándose con el antibiótico Neomicina 30 ug/ml
sobre cepas de Escherichia coli ATCC 8739.
29
 IV.3 Recomendaciones
 Realizar nuevos estudios de la planta de Synadenium grantii Hook (Árbol
de la vida), desarrollando un análisis fitoquímico en un nuevo estudio
permitiendo conocer los principios activos responsables de las diferentes
actividades terapéuticas que se le atribuyen.
 Se recomienda para nuevos estudios de investigación de la especie
vegetal Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida) tener en cuenta las
diversas zonas geográficas y clima para su estudio científico.
 Promover e impulsar la investigación sobre las diversas especies
vegetales en docentes y egresados de la Universidad María Auxiliadora
para dar un conocimiento novedoso a la población.
30
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35. Villardón JL V. Introducción al análisis de la varianza. :1–20.
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36. García Huamán FT, Trauco MA. Efecto del extracto de plantas
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37. Domingo D., López-Brea M. Plantas con acción antimicrobiana. Rev
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3429/16/4/385.pdf
37
ANEXOS
ANEXO A: Instrumentos de recolección de datos
TABLA A: PRUEBA DE SOLUBILIDAD
N° SOLVENTES RESULTADO
1 ETANOL
2 METANOL
3 AGUA DESTILADA
4 ACETIL CETONA
5 CLOROFORMO
7 BUTANOL
LEYENDA
· INSOLUBLE (-)
· POCO SOLUBLE (+)
· SOLUBLE (++)
· MUY SOLUBLE (+++)
Fuente: Elaboración propia
38
TABLA B: PRUEBA MARCHA FITOQUÍMICA
MARCHA FITOQUÍMICA
PRINCIPIO PRUEBA MÉTODO RESULTADOS
ACTIVO
ANTOCIANINAS Prueba cualitativa Cualitativo
Reacción de
Dragendorff Cualitativo
ALCALOIDES Reacción de Mayer Cualitativo
Reacción de Wagner Cualitativo
LACTONAS Reacción  de Baljet Cualitativo
FLAVONOIDES Reacción de Ninhidrina Cualitativo
CARDENOLIDOS Reacción de Kedde Cualitativo
Reacción de Cualitativo
ESTEROIDES Liebermann- Burchard
SAPONINAS Reacción de espuma Cualitativo
Reacción de cloruro
TANINOS férrico Cualitativo
Reacción de
TRITERPENOS Liebermann- Burchard Cualitativo
Reacción de Cloruro
FENOLES férrico Cualitativo
LEYENDA:
· REACCIÓN MUY EVIDENTE (+++)
· REACCIÓN EVIDENTE (++)
· REACCIÓN POCO EVIDENTE (+)
· NO HUBO REACCIÓN (-)
Fuente: Elaboración propia
39
TABLA C: ENSAYO MICROBIOLÓGICO
EXTRACTO GLICÓLICO DE LAS HOJAS DE Synadenium
MICROORGANISMO grantii Hook (Árbol de la Vida)
LONGITUD DE HALOS DE INHIBICIÓN (mm)
TIEMPO DE INCUBACIÓN : 24 HORAS
NEOMICINA AGUA 25% 50% 75% 100%
30UG/ML DESTILADA
Escherichia coli ATCC
8739
PROMEDIO
Fuente: Elaboración propia
40
ANEXO B: Matriz de consistencia
Formulación del problema Objetivos Hipótesis
Problema General Objetivo General Hipótesis General
¿Cuál será el resultado de la actividad Determinar la actividad antibacteriana del El extracto glicólico de las hojas de Synadenium
antibacteriana del extracto glicólico de las hojas extracto glicólico de las hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida) tiene actividad
de Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida), grantii Hook (Árbol de la vida) sobre cepas de antibacteriana frente a cepas de Escherichia coli
sobre cepas de Escherichia coli ATCC 8739? Escherichia coli ATCC 8739. ATCC 8739.
Problemas Específicos Objetivos Específicos Hipótesis Específicas
1.-¿Qué metabolitos secundarios en el tamizaje 1.-Definir la presencia de metabolitos 1.- El extracto glicólico de las hojas de
fitoquímico del extracto glicólico de las hojas de secundarios existentes en el extracto glicólico Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida)
Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida) de las hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol presenta metabolitos secundarios con actividad
serán los responsables en la actividad de la vida). antibacteriana.
antibacteriana?
2.- El extracto glicólico de las hojas de
2.-¿En qué concentración del extracto glicólico 2.-Identificar la concentración en la que muestra Synadenium grantii Hook (Árbol de la vida) a las
de las hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol actividad antibacteriana el extracto glicólico de concentraciones de 25%, 50% 75% y 100%
de la vida) tendrá la actividad antibacteriana las hojas de Synadenium grantii Hook (Árbol de presenta actividad antibacteriana frente a cepas de
frente a cepas de Escherichia coli ATCC 8739? la vida) frente a cepas de Escherichia coli ATCC Escherichia coli ATCC 8739.
8739.
ANEXO C: Operacionalización de las variables
VARIABLES DEFINICIÓN DEFINICIÓN ESCALA DE N° DECONCEPTUAL OPERACIONAL DIMENSIONES INDICADORES MEDICIÓN ÍTEMS VALOR
25%,
50%
75%
Extracto glicólico 4 100%
INDEPENDIENTE Concentración del Concentración a en diferentes
Nominal
Extracto glicólico de Producto líquido extracto glicólico de evaluar concentraciones Muy evidente
las hojas de que comprende las hojas de (+++)
Synadenium grantii los metabolitos Synadenium grantii Evidente (++)
Hook (Árbol de la secundarios de la Hook (Árbol de la Presencia de Poco evidente
vida). especie vegetal. vida). Marcha metabolitos (+)
fitoquímica secundarios Nominal 4 No hubo
reacción (-)
Capacidad de una
DEPENDIENTE sustancia para Sensibilidad
destruir los bacteriana frente al Crecimiento
Actividad microorganismos extracto glicólico de
antibacteriana frente o impedir su las hojas de Microbiológico Medición de halos Razón 2
a cepas  de multiplicación o Synadenium grantii de inhibición.
Escherichia coli desarrollo de una Hook (Árbol de la No hubo
ATCC 8739. población vida). crecimiento
bacteriana.
42
ANEXO D: Constancia de Estudio Taxonómico de la especie vegetal
ANEXO E: Certificado de análisis de Escherichia coli ATCC 8739
44
ANEXO F: Evidencias fotográficas del trabajo de campo
TOMA DE
MUESTRA
Fuente: Especie vegetal de Synadenium grantii Hook.
Fuente: Los investigadores en la recolección de las hojas de la especie vegetal
Synadenium grantii Hook.
45
ENSAYO DE SOLUBILIDAD
MARCHA FITOQUÍMICA
46
INCUBACIÓN Y LECTURA DE RESULTADOS
  25%
Fuente: Resultados al 25% del extracto glicólico de las hojas de Synadenium grantii Hook.
50%
47
Fuente: Resultados al 50% del extracto glicólico de las hojas de Synadenium grantii Hook.
75%
48
Fuente: Resultados al 75% del extracto glicólico de las hojas de Synadenium grantii Hook.
100%
49
Fuente: Resultados al 100% del extracto glicólico de las hojas de Synadenium grantii Hook.
CONTROL NEGATIVO
50
Fuente: Resultados del control negativo (agua destilada).
CONTROL POSITIVO
51
Fuente: Resultados del control positivo de Neomicina 30 ug/ml.
CONTROL POSITIVO
52
Fuente: Resultados del control positivo con Neomicina 30 ug/ml.
53